
Os sistemas bifásicos aquosos são utilizados em muitos processos biotecnológicos, sendo a purificação de proteínas uma das suas aplicações mais importantes. O soro apesar de ser um subproduto da indústria de lacticínios, possui um elevado valor nutritivo uma vez que retém a maior parte dos componentes do leite. Cerca de 80% da proteína no soro consiste em β-lactoglobulina (βlg) e α-lactalbumina (αla) e ambas são extremamente nutritivas. O componente PP3 da fracção proteose peptonas do soro de queijo (10% da proteína do soro) é de grande interesse devido às suas propriedades funcionais, particularmente à sua capacidade emulsificante, grande afinidade para a interface óleoágua, fortes propriedades espumantes e papel bioquímico, nomeadamente de regulação espontânea da lipólise no leite. As proteínas do soro puras e no seu estado nativo têm elevado valor funcional e nutricional não encontrado noutras proteínas vulgarmente utilizadas como aditivos na indústria alimentar, pelo que tem havido um crescente interesse no seu fraccionamento. Numa primeira fase deste trabalho pretendeu-se seleccionar um sistema bifásico aquoso que permitisse a melhor separação das proteínas maioritárias do soro de queijo (βlg e αla), tendo sido testados os sistemas PEG-Reppal, PEG-Fosfato e PEG-Sulfato. Estes estudos foram efectuados inicialmente com proteínas puras e após optimizado o melhor sistema com concentrado proteico de soro fornecido pela Quinta dos Ingleses. A partição das proteínas foi caracterizada pela determinação dos coeficientes de partição, rendimentos (Yαla,S e Yβlg,I), graus de pureza e recuperações. Realizaram-se várias experiências de partição variando parâmetros como concentração e peso molecular de PEG, pH, adição de sais e força iónica. Os resultados obtidos permitem concluir que os sistemas PEG-sais parecem mais adequados para separar as duas proteínas, uma vez que permitem concentrá-las em fases distintas. Ensaios efectuados com proteínas puras no sistema 14%p/p PEG900 + 14%p/p Fosfato, pH 7,0 permitem obter um kαla = 4,39 e um kβlg = 0,16 com rendimentos de 75,9% (Yαla,S) e 93,2% (Yβlg,I) respectivamente. O sistema 18%p/p PEG900 + 14%p/p Sulfato, pH 7,0 permitiu obter um kαla = 12,80 e um kβlg = 0,34 com rendimentos de 96,7% (Yαla,S) e 83,8% (Yβlg,I) respectivamente. Numa segunda fase deste trabalho pretendeu-se por partição bifásica aquosa promover a purificação do componente PP3. O componente PP3 foi extraído do concentrado proteico de soro fornecido pela Quinta dos Ingleses. Foram testados os sistemas PEG-Reppal e PEG-Fosfato variando parâmetros como concentração e peso molecular de PEG, pH e força iónica. Os resultados obtidos permitem concluir que num sistema 16%p/p PEG4000 + 16%p/p Reppal, pH 7,0, se consegue a partição do componente PP3 para a fase superior do sistema com kPP3 = 12,30 e um rendimento de 80-90%.
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