A pele, o maior órgão do corpo, desempenha um papel crucial na proteção e na manutenção da homeostasia. A camada mais externa, o estrato córneo (SC), atua como uma barreira que previne a perda de água e protege contra fatores ambientais. Compreender as características individuais da pele é essencial para cuidados de beleza personalizados, permitindo decisões informadas na gestão de condições cutâneas e rotinas diárias. Como a hidratação é crucial para a homeostasia da pele, qualquer desvio dos níveis normais pode ter um impacto significativo nas suas propriedades e funções. Assim, analisar os componentes moleculares da pele é essencial para entender como os hidratantes reforçam a barreira cutânea e mantêm a hidratação. O objetivo deste estudo foi fornecer informações sobre os componentes moleculares da pele de voluntários humanos, utilizando a espectroscopia confocal de Raman (CRS) não invasiva, em conjunto com medições biofísicas. O estudo incluiu 48 voluntários, homens e mulheres de várias idades. Adicionalmente, foram investigadas as alterações nas características da pele após a aplicação de um creme hidratante comercial num dos antebraços durante duas semanas, com o antebraço não tratado servindo como controlo. A tecnologia inovadora CRS mediu in vivo o conteúdo total de água, o fator de hidratação natural (NMF) e os seus componentes (ureia, ácido láctico), bem como os principais lípidos do SC (colesterol, ceramidas e ácidos gordos livres). A hidratação foi avaliada utilizando um corneómetro e um tewameter. As medições de CRS na pele natural mostraram níveis mais elevados de colesterol, NMF e ureia no grupo mais velho. As diferenças de género foram mais pronunciadas, com os homens a exibirem maiores concentrações de lactato e ureia. Após a aplicação do hidratante, os níveis de hidratação e o conteúdo de ceramidas e de ácidos gordos aumentaram em todos as faixas etárias. Em conclusão, a hidratação a curto prazo parece insuficiente para produzir alterações significativas nos componentes moleculares da pele. No entanto, a hidratação da pele foi melhorada pela aplicação do hidratante. São necessários mais estudos com uma amostra maior de voluntários e com regimes de tratamento prolongados para analisar os efeitos das rotinas diárias de aplicação de hidratante.