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Estudos preliminares da bioatividade de hidrolisados de matriz extracelular

Authors: Pereira, Isabel Sofia Melo;

Estudos preliminares da bioatividade de hidrolisados de matriz extracelular

Abstract

A medicina regenerativa e a engenharia de tecidos têm como objetivo promover a regeneração de tecidos ou substituir os órgãos não funcionais, através da combinação de um scaffold, células adequadas e moléculas bioativas. Os scaffolds de matriz extracelular descelularizada (MEC) têm sido utilizados com sucesso em aplicações da medicina regenerativa para facilitar e promover a remodelação construtiva de inúmeros tecidos. Os mecanismos pelos quais a remodelação do tecido hospedeiro é conseguida ainda não são totalmente compreendidos, mas estudos recentes sugerem que alguns produtos de degradação da MEC (matricinas) desempenham papéis fundamentais. O presente estudo teve como objetivos obter diferentes frações de matricinas da matriz da bexiga de porco (UBM), através da digestão enzimática com pepsina e fracionamento por centrifugação e ultrafiltração, e avaliar e comparar a atividade quimiotática e mitogénica das diferentes frações de UBM em células estaminais mesenquimais de rato (MSCr) e em fibroblastos. Foi ainda testada a biocompatibilidade e o potencial osteogénico in vivo dos produtos de degradação da UBM incorporados num hidrogel de dextrino na reparação de pequenos defeitos ósseos. Neste trabalho foi analisada a bioatividade de três frações de UBM. Os resultados de proliferação obtidos com os fibroblastos mostraram que a fração de produtos totais da degradação de UBM inibe a proliferação celular. As frações de péptidos solúveis e com peso molecular inferior a 30 KDa não afetam o crescimento dos fibroblastos. Em relação às MSCr, os resultados da atividade proliferativa, embora preliminares, não confirmam o efeito pró-mitogénico dos produtos de degradação sobre estas células estaminais: a fração solúvel de UBM inibe a proliferação das MSCr, enquanto a fração de péptidos com peso molecular inferior a 30 KDa não afeta o crescimento destas células. Os resultados obtidos para a atividade quimiotática das frações de UBM, não foram conclusivos, uma vez que é necessário otimizar as condições do ensaio de migração. As diferenças no efeito mitogénico verificadas entre as distintas frações de UBM sugerem que, no final da digestão, o hidrolisado poderá conter matricinas pró- e anti-mitogénicas e até matricinas neutras. Assim, do fracionamento do hidrolisado podem resultar frações mais enriquecidas com um determinado tipo de matricinas (por exemplo, matricinas anti-mitogénicas) ou então, a sobreposição de um dos efeitos pode dever-se não à quantidade de matricinas que exibam esse efeito, mas sim à potência do efeito dessas matricinas e eventuais efeitos sinergéticos. Nas frações em que não se verificou qualquer propriedade mitogénica, a coexistência de matricinas com ação pró- e anti-mitogénica pode levar a uma anulação mútua desse efeito e/ou haver matricinas que não modulam a mitogénese das células usadas. Os resultados in vivo, embora preliminares, mostraram que o dextrino com UBM incorporada não provocou reação inflamatória e os produtos de degradação incorporados pareceram afetar o comportamento das células no hidrogel, dado que se observou uma organização celular semelhante a células de cartilagem. A formação de uma estrutura semelhante à cartilagem sugere que a formação óssea poderá ocorrer via endocondral.

Country
Portugal
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