A ventilação assistida é um método de suporte à vida que surge na necessidade de assegurar a respiração pulmonar e/ou como forma medicamentosa. Mas tal como em qualquer outra prática clínica, a ventilação assistida não está isenta de riscos e complicações, surgindo frequentemente a pneumonia associada à ventilação (PAV). No que respeita ao tratamento da PAV bacteriana, atualmente os fármacos mais prescritos ainda são antibióticos, que contribuem também como importantes agentes profiláticos. Contudo, a emergência da resistência aos antibacterianos tem levantado sérios e preocupantes paradigmas no que respeita ao sucesso do tratamento da PAV. Por conseguinte, só recentemente a prevalência de biofilmes mistos e o seu envolvimento nas formas mais graves da infeção têm sido considerados, pelo que as certezas sobre a influência de diferentes espécies microbianas na evolução e resolução clínica da PAV são ainda muito escassas e insuficientemente compreendidas. Em virtude disso, é clara a necessidade de explorar de forma mais criteriosa a associação polimicrobiana e a resposta a fatores de stresse. Nesse sentido, o principal objetivo deste trabalho foi observar o comportamento in vitro de diferentes comunidades bacterianas (culturas simples e polibacterianas de duas e três espécies), quando sujeitas ao tratamento com um antibiótico, a Tobramicina (Tob). As espécies usadas neste estudo são frequentemente detetadas em casos clínicos de PAV: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumannii, e Klebsiella pneumoniae. Inicialmente foi observada a capacidade de formação de biofilmes isolados e em co-cultura, por análise da viabilidade celular (determinando UFCs) e da biomassa total (através o método do violeta cristal - CV). Com o objetivo de avaliar a prevalência de espécies nos biofilmes formados por P.aeruginosa, uma vez que se trata do microrganismo mais implicado na PAV, os biofilmes constituído pela bactéria foram observados por microscopia usando a técnica de PNA FISH. As interações bacterianas sujeitas a antibioterapia foram observadas na forma plantónica e em biofilme. Os biofilmes formados por P.aeruginosa foram sujeitos à Tob durante a fase de crescimento. Nos biofilmes resultantes da combinação de todas espécies, a Tob foi administrada só após o crescimento do biofilme por 24 h. Nas células plantónicas determinaram-se as concentrações mínimas de inibição (CMI) e bactericida (CMB) da Tob das culturas isoladas e co-culturas. Observou-se que as espécies têm diferentes capacidades de formação de biofilme, especialmente evidenciada na biomassa. Os biofilmes formados por S. aureus, A. baumannii, e o consórcio S. aureus com K. pneumoniae, apresentaram menores valores de biomassa que os restantes biofilmes. Em relação à prevalência entre espécies, a P. aeruginosa, com exceção da combinação com A. baumannii, foi detetada em maior número que a(s) demais espécie(s) em co-cultura. Nos biofilmes crescidos com Tob, a ação do antibiótico na redução da viabilidade e da biomasaa foi significativa (p<0,05) em todos os biofilmes mesmo nas menores concentrações de antibiótico. Além disso não se detetou viabilidade celular nos biofilmes de P. aeruginosa, P. aeruginosa com S. aureus e A. baumannii, e P. aeruginosa com S. aures e K. pneumoniae a partir de 32 μg/mL de Tob. Nos biofilmes pré-formados os consórcios de dupla espécie parecem revelar maior tolerância à Tob que as comunidades triplas e simples. Mas em todos os casos a Tob provocou reduções de biofilme (p<0,05) com diferentes concentrações, dependendo dos microrganismos na cultura. Também no estado plantónico, as culturas formadas por duas espécies parecem revelam maiores exigências, ao passo que as constituídas por uma só espécie e pela combinação de três espécies apresentaram maior sensibilidade. Após a conclusão deste trabalho laboratorial é agora mais claro que as interações entre diferentes microrganismos podem contribuir para o progresso da doença. Em geral, os resultados parecem apontar que os ambientes polibacterianos constituem um habitat favorável à sobrevivência dos microganismos, tanto no estado plantónico como em biofilme, pois as interações estabelecidas parecem ser mutuamente benéficas. A presença de um terceiro interveniente poderá alterar a virulência e o fenótipo de todo o microbioma, pelo que outros estudos seriam necessários para esclarecer e perceber quais os mecanismos despoletados pela presença de uma terceira bactéria.