Un virus recombinant dépourvu du gène sf32 (Sf32null), unique au nucléopolyhédrovirus multiple de Spodoptera frugiperda (SfMNPV), a été généré par recombinaison homologue à partir d'un bacmide comprenant le génome viral complet (Sfbac). L'analyse transcriptionnelle a révélé que sf32 est un gène précoce. Les corps d'occlusion (OBs) de Sf32null contenaient 62 % plus d'ADN génomique que les virus contenant le gène sf32, Sfbac et Sf32null-repair, bien que l'ADN de Sf32null soit trois fois moins infectieux lorsqu'il est injecté in vivo. Les OBs Sf32null avaient un diamètre 18 % plus grand et contenaient 17 % plus de nucléocapsides dans les ODV que ceux de Sfbac. Aucune différence significative n'a été détectée dans la pathogénicité de l'OB (concentration létale de 50%), la vitesse de destruction ou la production de virus bourgeonné in vivo. En revanche, la production d'OBs/larves a été réduite de 39% chez les insectes infectés par Sf32null par rapport à ceux infectés par Sfbac. La séquence protéique prédite par SF32 a montré une homologie (25 % d'identité, 44 % de similitude) avec deux protéines d'adhésion de Streptococcus pyogenes et un seul site de N-mirystoylation a été prédit. Nous concluons que SF32 est une protéine non essentielle qui pourrait être impliquée dans l'organisation des nucléocapsides pendant l'assemblage ET l'occlusion des ODV, entraînant une augmentation du nombre de nucléocapsides dans les ODV.

Se generó un virus recombinante que carecía del gen sf32 (Sf32null), exclusivo del nucleopoliedrovirus múltiple de Spodoptera frugiperda (SfMNPV), mediante recombinación homóloga a partir de un bácmido que comprende el genoma viral completo (Sfbac). El análisis transcripcional reveló que sf32 es un gen temprano. Los cuerpos de oclusión (OB) de Sf32null contenían un 62% más de ADN genómico que los virus que contenían el gen sf32, Sfbac y Sf32null-repair, aunque el ADN de Sf32null fue tres veces menos infeccioso cuando se inyectó in vivo. Las OB Sf32null eran un 18% más grandes en diámetro y contenían un 17% más de nucleocápsides dentro de las ODV que las de Sfbac. No se detectaron diferencias significativas en la patogenicidad de OB (concentración letal del 50%), la velocidad de eliminación o la producción de virus en gemación in vivo. Por el contrario, la producción de OB/larva se redujo en un 39% en los insectos infectados por Sf32null en comparación con los infectados por Sfbac. La secuencia de proteína predicha SF32 mostró homología (25% de identidad, 44% de similitud) con dos proteínas de adhesión de Streptococcus pyogenes y se predijo un único sitio de N-miristoilación. Concluimos que SF32 es una proteína no esencial que podría estar involucrada en la organización de la nucleocápside durante el ensamblaje y LA oclusión de ODV, lo que resulta en un mayor número de nucleocápsides dentro de las ODV.

A recombinant virus lacking the sf32 gene (Sf32null), unique to the Spodoptera frugiperda multiple nucleopolyhedrovirus (SfMNPV), was generated by homologous recombination from a bacmid comprising the complete viral genome (Sfbac). Transcriptional analysis revealed that sf32 is an early gene. Occlusion bodies (OBs) of Sf32null contained 62% more genomic DNA than viruses containing the sf32 gene, Sfbac and Sf32null-repair, although Sf32null DNA was three-fold less infective when injected in vivo. Sf32null OBs were 18% larger in diameter and contained 17% more nucleocapsids within ODVs than those of Sfbac. No significant differences were detected in OB pathogenicity (50% lethal concentration), speed-of-kill or budded virus production in vivo. In contrast, the production of OBs/larva was reduced by 39% in insects infected by Sf32null compared to those infected by Sfbac. The SF32 predicted protein sequence showed homology (25% identity, 44% similarity) to two adhesion proteins from Streptococcus pyogenes and a single N-mirystoylation site was predicted. We conclude that SF32 is a non-essential protein that could be involved in nucleocapsid organization during ODV assembly and occlusion, resulting in increased numbers of nucleocapsids within ODVs.

تم توليد فيروس مؤتلف يفتقر إلى جين sf32 (Sf32null)، الفريد من نوعه لفيروس Spodoptera frugiperda متعدد النواة (SfMNPV)، عن طريق إعادة التركيب المتماثل من bacmid الذي يشتمل على الجينوم الفيروسي الكامل (Sfbac). كشف التحليل النسخي أن sf32 هو جين مبكر. احتوت أجسام الانسداد (OBs) من Sf32null على 62 ٪ من الحمض النووي الجيني أكثر من الفيروسات التي تحتوي على جين sf32، وإصلاح Sfbac و Sf32null، على الرغم من أن الحمض النووي Sf32null كان أقل عدوى بثلاثة أضعاف عند حقنه في الجسم الحي. كان Sf32null OBs أكبر في القطر بنسبة 18 ٪ واحتوى على 17 ٪ من النوكليوكبسيدات داخل ODVs أكثر من تلك الموجودة في Sfbac. لم يتم الكشف عن اختلافات كبيرة في التسبب في أمراض OB (تركيز مميت بنسبة 50 ٪)، أو سرعة القتل أو إنتاج الفيروس الناشئ في الجسم الحي. في المقابل، انخفض إنتاج OBs/Larva بنسبة 39 ٪ في الحشرات المصابة بـ Sf32null مقارنة بالحشرات المصابة بـ Sfbac. أظهر تسلسل البروتين المتنبأ به SF32 تماثلًا (هوية 25 ٪، تشابه 44 ٪) مع اثنين من بروتينات الالتصاق من مولدات تقيح المكورات العقدية وموقع N - mirystoylation واحد تم التنبؤ به. نستنتج أن SF32 هو بروتين غير أساسي يمكن أن يشارك في تنظيم القفيصة النووية أثناء تجميع وانسداد OdV، مما يؤدي إلى زيادة أعداد القفيصة النووية داخل ODVs.