Les nouvelles technologies dans le domaine de la vaccinologie apparaissent comme une nécessité pour le traitement et le contrôle de nombreuses maladies. Les virus vivants actuellement modifiés et les vaccins inactivés utilisés pour l'herpèsvirus bovin-1 (BoHV-1) présentent plusieurs inconvénients. Les travaux précédents pour le traitement préventif du BoHV-1 avec des vaccins à base d'ADN ont démontré la capacité d'induire une réponse immunitaire humorale et cellulaire. Cependant, il est bien connu que l'ADN « nu » induit une faible réponse immunogène. Ainsi, le chargement des séquences d'ADN codant pour l'antigène dans les formulations liposomales ciblant les récepteurs des cellules dendritiques pourrait être une stratégie prometteuse pour mieux les activer cellules présentatrices d'antigènes (APC).Dans ce travail, le vaccin à base d'ADN codant pour la version tronquée de la glycoprotéine gD (pCIgD) du BoHV-1 a été étudié seul et lors de l'encapsulation sur une formulation liposomale enrobée de MANα1-2MAN-PEG-DOPE et de LPS de Brucella ovis (pCIgD-Man-L) chez la souris et le bétail.Les résultats ont montré que l'utilisation de pCIgD-Man-L était capable d'améliorer la réponse immunitaire dans les deux modèles animaux. Des niveaux significatifs d'immunité humorale ont été atteints lorsque des titres d'anticorps totaux et des isotypes ont été détectés dans les sérums et les muqueuses.Pour l'immunité cellulaire, une lymphoprolifération virale spécifique a été détectée dans les animaux inoculés avec pCIgD-Man-L.En outre, une modulation positive des molécules CD40 à la surface des cellules dendritiques bovines (DC) a été observée lorsque les cellules ont été stimulées et activées avec des formulations vaccinales. Lorsque le test de provocation a été effectué, les bovins inoculés avec pCIgD et le liposome décoré avec MANα1-2MAN-PEG-DOPE ont suscité une meilleure protection et une diminution de l'excrétion virale. Les résultats démontrent le ciblage des liposomes revêtus de MANα1-2MAN vers les cellules dendritiques et leur capacité à stimuler l'immunogénicité selon un effet adjuvant qui entraîne une immunité durable. Le liposome décoré avec MANα1-2MAN-PEG-DOPE a été pour la première fois testé comme vaccin à base d'ADN chez les bovins en tant que traitement préventif du BoHV-1. Ces résultats ouvrent de nouvelles perspectives pour la conception d'un vaccin pour le contrôle de la rhinotrachéite bovine.

Las nuevas tecnologías en el campo de la vacunología surgen como necesidad para el tratamiento y control de muchas enfermedades. Los virus vivos actualmente modificados y las vacunas inactivadas utilizadas para el herpesvirus bovino-1 (BoHV-1) tienen varias desventajas. Trabajos anteriores para el tratamiento preventivo del BoHV-1 con vacunas basadas en ADN han demostrado la capacidad de inducir una respuesta inmune humoral y celular. Sin embargo, es bien sabido que el ADN "desnudo" induce una respuesta inmunogénica baja. Por lo tanto, la carga de secuencias de ADN que codifican antígenos en formulaciones liposómicas dirigidas a receptores de células dendríticas podría ser una estrategia prometedora para activar mejor estos células presentadoras de antígeno (APC).En este trabajo, se investigó la vacuna basada en ADN que codifica la versión truncada de la glicoproteína gD (pCIgD) de BoHV-1 sola y tras la encapsulación en una formulación liposómica recubierta con MANα1-2MAN-PEG-DOPE y LPS de Brucella ovis (pCIgD-Man-L) en ratones y ganado. Los resultados mostraron que el uso de pCIgD-Man-L fue capaz de mejorar la respuesta inmune en ambos modelos animales. Se lograron niveles significativos de inmunidad humoral cuando se detectaron títulos e isotipos de anticuerpos totales en suero y mucosa. Para la inmunidad celular, se detectó linfoproliferación viral específica en ambos modelos animales. los animales inoculados con pCIgD-Man-L. Además, se observó una modulación positiva de las moléculas de CD40 en la superficie de las células dendríticas bovinas (CD) cuando las células se estimularon y activaron con formulaciones de vacuna. Cuando se realizó el ensayo de exposición, los bovinos inoculados con pCIgD y liposomas decorados con MANα1-2MAN-PEG-DOPE provocaron una mejor protección y disminuyeron la excreción viral. Los resultados demuestran la orientación de los liposomas recubiertos con MANα1-2MAN hacia las células dendríticas y su capacidad para aumentar la inmunogenicidad de acuerdo con un efecto adyuvante que resulta en inmunidad duradera. Los liposomas decorados con MANα1-2MAN-PEG-DOPE se probaron por primera vez como vacuna basada en ADN en ganado como tratamiento preventivo de BoHV-1. Estos resultados abren nuevas perspectivas para el diseño de una vacuna para el control de la rinotraqueítis bovina.

New technologies in the field of vaccinology arise as necessity for treatment and control of many diseases.Currently modified live virus and inactivated vaccines used for Bovine Herpesvirus-1 (BoHV-1) have several disadvantages.Previous works for preventive treatment of BoHV-1 with DNA based vaccines have demonstrated the capability to induce humoral and cellular immune response.Nevertheless, it is well known that "naked" DNA induces low immunogenic response.Thus, loading of antigen encoding DNA sequences in liposomal formulations targeting dendritic cell receptors could be a promising strategy to better activate these antigen presenting cells (APC).In this work, DNA based vaccine encoding the truncated version of gD glycoprotein (pCIgD) of BoHV-1 was investigated alone and upon encapsulation on liposomal formulation coated with MANα1-2MAN-PEG-DOPE and LPS from Brucella ovis (pCIgD-Man-L) in mice and cattle assay.Results showed that the use of pCIgD-Man-L was capable to enhance the immune response in both animal models.Significant levels of humoral immunity were achieved when total antibody titers and isotypes were detected in sera and mucosa.For cellular immunity, specific viral lymphoproliferation was detected in the animals inoculated with pCIgD-Man-L.In addition, positively modulation of CD40 molecules on the surface of bovine dendritic cells (DCs) was observed when cells were stimulated and activated with vaccine formulations.When challenge assay was performed, bovines inoculated with pCIgD and liposome decorated with MANα1-2MAN-PEG-DOPE elicited better protection and diminished viral excretion.The results demonstrate the targeting of the MANα1-2MAN coated liposomes toward dendritic cells and their ability to boost the immunogenicity according to an adjuvant effect that results in long-lasting immunity.Liposome decorated with MANα1-2MAN-PEG-DOPE were for the first time tested as DNA based vaccine in cattle as preventive treatment of BoHV-1.These results open up new perspectives for the design of vaccine for the control of bovine rhinotracheitis.

تنشأ التقنيات الجديدة في مجال علم اللقاحات كضرورة للعلاج والسيطرة على العديد من الأمراض. يحتوي الفيروس الحي المعدل حاليًا واللقاحات المعطلة المستخدمة لفيروس الهربس البقري -1 (BoHV -1) على العديد من العيوب. أثبتت الأعمال السابقة للعلاج الوقائي لـ BoHV -1 باللقاحات القائمة على الحمض النووي القدرة على تحفيز الاستجابة المناعية الخلطية والخلوية. ومع ذلك، فمن المعروف جيدًا أن الحمض النووي "العاري" يحفز استجابة مناعية منخفضة. وبالتالي، فإن تحميل تسلسلات الحمض النووي المشفرة بالمستضد في التركيبات الشحمية التي تستهدف مستقبلات الخلايا التغصنية يمكن أن يكون استراتيجية واعدة لتنشيطها بشكل أفضل خلايا عرض المستضد (APC). في هذا العمل، تم التحقيق في اللقاح القائم على الحمض النووي الذي يشفر النسخة المبتورة من البروتين السكري gD (pCIgD) من BoHV -1 بمفرده وعند التغليف على تركيبة الجسيمات الدهنية المغلفة بـ MANα 1-2 MAN - PEG - DOPE و LPS من Brucella ovis (pCIgD - Man - L) في مقايسة الفئران والماشية. أظهرت النتائج أن استخدام pCIgD - Man - L كان قادرًا على تعزيز الاستجابة المناعية في كلا النموذجين الحيوانيين. تم تحقيق مستويات كبيرة من المناعة الخلطية عندما تم الكشف عن مجموع الأجسام المضادة والأنماط المتماثلة في الأمصال والغشاء المخاطي. الحيوانات التي تم تلقيحها بـ pCIgD - Man - L. بالإضافة إلى ذلك، لوحظ تعديل إيجابي لجزيئات CD40 على سطح الخلايا التغصنية البقرية (DCs) عندما تم تحفيز الخلايا وتنشيطها باستخدام تركيبات اللقاح. عندما تم إجراء اختبار التحدي، تم تلقيح الأبقار بـ pCIgD والجسيم الشحمي المزين بـ MANα 1-2 MAN - PEG - DOPE مما أدى إلى الحصول على حماية أفضل وإفراز فيروسي متناقص. تظهر النتائج استهداف الجسيمات الشحمية المغلفة بـ MANα 1-2 MAN تجاه الخلايا التغصينية وقدرتها على تعزيز المناعة وفقًا لتأثير مساعد يؤدي إلى مناعة طويلة الأمد. تم اختبار الجسيم الشحمي المزين بـ MAN α 1-2 MAN - PEG - DOPE لأول مرة كلقاح قائم على الحمض النووي في الماشية كعلاج وقائي لـ BoHV -1. تفتح هذه النتائج آفاقًا جديدة لتصميم اللقاح للتحكم في التهاب الأنف والأنف البقري.