The aim. Synthesis of 1-benzylsubstituted derivatives of N-[(2,4-dichlorophenyl)methyl]-2-(2,4-dioxo-1h-quinazolin-3-yl)acetamide, and determination of affinity to GABAergic biotargets with the following anticonvulsant activity estimation using PTZ-induced seizures model in mice. Materials and methods. Standard organic synthesis methods were used; the structure of the synthesized compounds was proved by elemental analysis, 1H and 13C NMR spectroscopy, and LC/MS method; composition of the synthesized compounds – by elemental analysis, their individuality – by TLC and LC/MS methods. AutoDockTools-1.5.6, as well as AutoDock Vina software, was used to perform molecular docking. Anticonvulsant activity was studied using pentylenetetrazole-induced seizures in mice. Results. A targeted N-[(2,4-dichlorophenyl)methyl]-2-(1-(R-benzyl)-2,4-dioxo-quinazolin-3-yl)acetamides were obtained by alkylation of N-[(2,4-dichlorophenyl)methyl]-2-(2,4-dioxo-1H-quinazolin-3-yl)acetamide by corresponding 1-chloromethylbenzene in dimethylformamide environment with excess of potassium carbonate at a temperature 70-80 ˚С. Prediction of activity of 1-benzyl derivatives in the pentylenetetrazole-induced seizures in an in vivo experiment was carried out according to the obtained results of docking studies – affinity calculation for GABA receptor and GABA enzyme active sites, as well as analysis of conformational placement in them. In relation to the binding energy, the studied ligands were inferior to the reference drugs: GABA receptor positive allosteric modulators – benzamidine and diazepam, and GABA inhibitor – vigabatrin. The synthesized substances did not show anticonvulsant activity: only 2 compounds have shown a tendency to their activity manifestation according to the criterion of integral protective indicator – reduction of mortality by 17 % compared to control, as well as prolonging the time death of the animals. Comparison with the preliminary obtained results of the activity of the promising anticonvulsant N-[(2,4-dichlorophenyl)methyl] -2-(2,4-dioxo-1H-quinazolin-3-yl) acetamide N-[(2,4-dichlorophenyl)methyl]-2-(2,4-dioxo-1H-quinazolin-3-yl)acetamide made possible to prove the pharmacophore role of the cyclic amide fragment in anticonvulsant activity manifestation. Conclusion. The synthesis of N-[(2,4-dichlorophenyl)methyl]-2-(1-(R-benzyl)-2,4-dioxo-quinazolin-3-yl)acetamides, which have not still described in the literature, was carried out, as well as the structure of the mentioned compounds was proved. Unfortunately, the substances did not show anticonvulsant activity on the model of pentylenetetrazole-induced seizures. However, the obtained results allowed establishing the key role of the NHCO cyclic fragment on anticonvulsant activity. A positive correlation between the results of in vivo studies and in silico calculations was found – the model of pentylenetetrazole-induced seizures and docking into the active sites of PAMs GABAА receptor and enzyme inhibitor GABAАТ, which allows to recommend the given docking methodology as a tool to streamline and optimize the screening on the mentioned model

Цель. Синтез 1-бензилзамещенных производных N-[(2,4-дихлорофенил)метил]-2-(2,4-диоксо-1Н)-хиназолин-3-ил)ацетамида, определение аффинитета к ГАМКергических биомишеней с последующим исследованием противосудорожной активности на PTZ -модели судорог у мышей. Материалы и методы. В работе использовали стандартные методы органического синтеза, структура синтезированных соединений подтверждена элементным анализом, 1H и 13С ЯМР-спектроскопией, LC/MS, состав – элементным анализом, индивидуальность – ТСХ и хромато-масс-спектрометрией. Молекулярный докинг осуществлен AutoDockTools-1.5.6 и AutoDock Vina. Противосудорожная активность изучена на пентилентетразоловой модели судорог у мышей. Результаты. Целевые N-[(2,4-дихлорофенил)метил]-2-(1-(R-бензил)-2,4-диоксо-хиназолин-3-ил)ацетамиды получены алкилированием N-[(2,4-дихлорфенил)метил]-2-(2,4-диоксо-1H-хиназолин-3-ил)ацетамида соответствующими 1-хлорметилбензенами в среде диметилформамида в присутствии избытка калия карбоната при температуре 70-80 ˚С. Прогнозирование активности 1-бензилпроизводных на пентилентетразоловой модели судорог в in vivo эксперименте осуществлено по результатам докинговых исследований – расчета аффинности к активным сайтам ГАМКА рецептора и энзима ГАМКАТ, а также анализа конформационного размещения в них. Исследуемые лиганды уступали по показателю энергии связывания препаратам сравнения: положительным аллостерическим модуляторам ГАМКА рецептора – бензамидину и диазепаму, и ингибитору ГАМКАТ – вигабатрину. Синтезированные вещества не продемонстрировали противосудорожную активность: только 2 соединения выявили тенденцию к проявлению активности по критерию интегрального защитного показателя – уменьшение летальности на 17 % по сравнению с контролем и продлевая время до гибели животных. Сопоставление с предварительными результатами активности перспективного антиконвульсанта N-[(2,4-дихлорфенил)метил]-2-(2,4-диоксо-1H-хиназолин-3-ил)ацетамида позволило доказать фармакофорную роль циклического амидного фрагмента в проявлении противосудорожной активности. Выводы. Осуществлен синтез и доказано строение не описанных в литературе N-[(2,4-дихлорофенил)метил]-2-(1-(R-бензил)-2,4-диоксо-хиназолин-3-ил)ацетамидов. На пентилентетразоловой модели судорог у мышей исследуемые соединения, к сожалению, не продемонстрировали противосудорожную активность. Однако полученные результаты позволили установить ключевую роль циклического фрагмента NHCO на противосудорожную активность. Определена положительная корреляция между результатами in vivo исследований и in silico расчетов – модель пентилентетразоловых судорог и докинг в активные сайты PAMs ГАМКА рецептора и ингибитора энзима ГАМКАТ, что позволяет рекомендовать представленную методологию докинга как инструмент как рационализации и оптимизации скрининга

Мета. Синтез 1-бензилзаміщених похідних N-[(2,4-дихлорофеніл)метил]-2-(2,4-діоксо-1Н)-хіназолін-3-іл)ацетаміду, визначення афінітету до ГАМКергічних біомішеней з наступним дослідженням протисудомної активності на PTZ-моделі судом у мишей. Матеріали та методи. У роботі використовували стандартні методи органічного синтезу, структура синтезованих сполук доведено елементним аналізом, 1H та 13С ЯМР-спектроскопією, LC/MS, склад елементним аналізом, індивідуальність – ТШХ та хромато-мас-спектрометрією. Молекулярний докінг здійснено AutoDockTools-1.5.6 та AutoDock Vina. Протисудомну активність вивчено на пентилентетразоловій моделі судом у мишей. Результати. Цільові N-[(2,4-дихлорофеніл)метил]-2-(1-(R-бензил)-2,4-диоксо-хіназолін-3-іл)ацетаміди одержано алкілуванням N-[(2,4-дихлорфеніл)метил]-2-(2,4-диоксо-1H-хіназолін-3-іл)ацетаміду відповідними 1-хлорометилбензенами у середовищі диметилформаміду в присутності надлишку калій карбонату при температурі 70–80 ˚С. Прогнозування активності 1-бензилпохідних на пентилентетразоловій моделі судом в in vivo експерименті здійснено за результатами докінгових досліджень – розрахунку афінності до активних сайтів ГАМКА рецептора та ензиму ГАМКАТ, а також аналізу конформаційного розміщення в них. Досліджувані ліганди поступалися за показником енергії зв’язування препаратам порівняння: позитивним алостеричним модуляторам ГАМКА рецептора – бензамідину та діазепаму, та інгібітору ГАМКАТ – вігабатрину. Синтезовані речовини не продемонстрували протисудомної активності: лише 2 сполуки виявили тенденція до прояву активності за критерієм інтегрального захисного показника – зменшення летальності на 17 % порівняно з контролем та подовжуючи час до загибелі тварин. Співставлення з попередніми результатами активності перспективного антиконвульсанта N-[(2,4-дихлорфеніл)метил]-2-(2,4-диоксо-1H-хіназолін-3-іл)ацетаміду дозволило довести фармакофорну роль циклічного амідного фрагменту в прояві протисудомної активності. Висновки. Здійснено синтез та доведено будову не описаних в літературі N-[(2,4-дихлорофеніл)метил]-2-(1-(R-бензил)-2,4-диоксо-хіназолін-3-іл)ацетамідів. На пентилентетразоловій моделі судом у мишей досліджувані сполуки на жаль не виявили протисудомої активності. Однак, одержані результати дозволили встановити ключову роль циклічного NHCO фрагменту на протисудомну активність. Визначено позитивну кореляцію між результатами in vivo досліджень та in silico розрахунків – модель пентилентетразолових судом та докінг в активні сайти PAMs ГАМКА рецептору та інгібітора ензиму ГАМКАТ, що дозволяє рекомендувати представлену методологію докінгу інструмент як для раціоналізації та оптимізації скринінгу на вказаній моделі