Resumo: Aliviar a dor e o sofrimento dos animais de laboratório é ético, humanitário e promove boa ciência. A inclusão de agentes supressores da dor em modelos farmacológicos, entretanto, requer detalhada pesquisa envolvendo as diversas opções de analgésicos ou anestésicos a fim de minimizar o estresse do animal experimental sem interferir negativamente no resultado da pesquisa. Utilizando o conceito de refinamento lançado por Russell e Burch na década de 50, o presente projeto tem por objetivo principal propor modificações em modelos experimentais de atividade secretora gástrica, inflamação e câncer, através do tratamento da dor e/ou estresse inerentes à metodologia em questão. No modelo de ligadura de piloro em ratos foi possível observar os benefícios decorrentes da supressão da dor nos dados experimentais através do uso de anestesia geral durante todo o período de teste. Tal medida de refinamento permitiu a redução da variabilidade da resposta intragrupo, a redução do número de animais utilizados, maior facilidade na execução dos procedimentos trans e pós-cirúrgico e, finalmente, a eliminação do sofrimento animal de forma significativa. O teste de edema de pata em ratos, quando utilizado apenas para a avaliação de possível atividade anti-inflamatória ¿ e não antinociceptiva ¿ provoca dor intensa nos animais em decorrência da inoculação do agente flogístico. Neste modelo foi proposto, portanto, a redução do sofrimento animal através do uso de anestésicos gerais e locais. O bloqueio do nervo ciático visando a eliminação da dor provocada pela inflamação induzida por carragenina não comprometeu a evolução do edema de pata em ratos, embora análises específicas de citocinas inflamatórias ainda sejam necessárias. Outro modelo experimental que possui a dor como subproduto não avaliado é o tumor de Ehrlich, frequentemente utilizado para a investigação de propriedades anticâncer de novos compostos. Em sua forma sólida, tanto em pata como em dorso, foi sugerido o uso de analgésicos opióides e enriquecimento ambiental, respectivamente. Em tumor de Ehrlich de flanco, a inclusão de tubos de PVC não ofereceu prejuízo à qualidade dos dados experimentais gerados, corroborando a tendência atual de inclusão desta forma de refinamento. Por sua vez, em modelo de Ehrlich de pata, o uso diário de morfina foi responsável por um melhor estado clínico dos animais, além de atuar de forma sinérgica com o quimioterápico na redução da massa tumoral. Como conclusão, o estresse decorrente dos procedimentos experimentais representa importante viés na pesquisa, influenciando tanto o bem-estar dos animais experimentais como a qualidade dos dados gerados

Abstract: Relieving pain and suffering from laboratory animals is ethical, humane and promotes good quality science. The inclusion of pain suppressors to pharmacological models, however, requires detailed research involving the various choices of analgesic drugs or anesthetics in order to minimize animal discomfort without impairing the parameters to be evaluated. Based on the concept of refinement introduced by Russell and Burch in the fifties, our project aims to propose modifications in three pharmacological experimental models: gastric secretion, inflammation and cancer. In the gastric secretion model in rats, it was possible to observe the benefits due to the use of general anesthesia during the entire experimental period. Such a refinement technique helped reduce the variability of intra-group response, the number of animals used, improved the execution of surgical procedures and, finally, decreased animal suffering significantly. The results obtained encouraged us to investigate the use of pain killers in other pharmacological models. The paw edema test in rats, for example, when used for assessing only the anti-inflammatory activity ¿ not the antinociceptive one ¿ causes intense pain due to the injection of the phlogistic agent. In this case, therefore, we propose the reduction of animal suffering through the use of anesthesia. Another experimental model in which pain is a non-evaluated byproduct involves the Ehrlich tumor, often used for the study of anticancer properties of a given substance. In both solid forms, either in the hind paw or the flank, we suggest the inclusion of opioid analgesic drugs or environmental enrichment, respectively. As a whole, this project is based on the investigation of the benefits of pain/stress relieving agents in the pharmacological models mentioned above. The refinement of the experimental protocols will be recommended in cases where benefits are not followed by any damage to relevant parameters

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Orientador: João Ernesto de Carvalho

Doutora em Ciências

Clínica Médica

Doutorado

FAEPEX

FAPESP

CNPQ