
handle: 10810/73483
[ES] Los amiloides son agregados de proteínas que se pliegan y ensamblan en estructuras alargadas y filamentosas, conocidas como fibrillas. Estas proteínas se han encontrado en el biofilm de la microbiota fecal de pacientes con síndrome del intestino irritable (SII). Ciertas bacterias comensales como Lactobacillus acidophilus, Lactococcus lactis y patobiontes como Enterococcus faecalis producen amiloides de la familia BAP, que regulan la interacción bacteriana y la formación de biofilms. Estas proteínas no solo modulan la ecología microbiana del intestino, sino que también pueden afectar a la salud del huésped al interactuar con patógenos, influyendo en su capacidad para formar biofilms y, por tanto, en la dinámica de las infecciones fúngicas. Este trabajo de investigación tuvo como objetivo principal estudiar el papel de los amiloides de la familia BAP (Biofilm Associated Protein) de las bacterias L. acidophilus, L. lactis y E. faecalis en un contexto de la microbiota intestinal relacionada con el SII. Los objetivos específicos incluyeron la producción de dominios amiloides de estas proteínas, el análisis de su efecto sobre la permeabilidad de la membrana intestinal y la evaluación de su influencia en el crecimiento de Candida albicans. Para abordar este objetivo, se realizaron estudios in vitro de producción y purificación de los dominios amiloides de L. acidophilus, L. lactis y E. faecalis, Bap_LA, Bap_LL y Esp, respectivamente. Se evaluó el impacto de Bap_LA y Bap_LL en la integridad y permeabilidad en un modelo de células epiteliales intestinales Caco-2 cultivadas en monocapa, mediante el análisis de la permeabilidad del FITC-dextrano y el análisis de la expresión de las proteínas de uniones estrechas, mediante inmunofluorescencia y Western blot. Además, se llevaron a cabo ensayos in vitro de formación de biofilm de dos cepas de C. albicans (SC5314 y ATCC-64124) y ensayo de determinación de actividad metabólica de las células adheridas al biofilm en presencia de los amiloides Bap_LA, Bap_LL y Esp. Los resultados obtenidos revelaron que las prefibrillas de Bap_LL incrementan la permeabilidad de la barrera intestinal, por lo que podría influir en la integridad del epitelio intestinal. La inmunofluorescencia determinó alteraciones en la distribución de claudina, ocludina y zonulina en células Caco-2 tratadas con Bap_LA y Bap_LL, sugiriendo un aumento de la permeabilidad intestinal. Bap_LL favoreció la formación del biofilm de la cepa SC5314 de C. albicans, mientras que Esp inhibió la formación del biofilm de C. albicans, lo que sugiere una interacción antagonista entre E. faecalis y C. albicans. Los hallazgos destacan cómo las proteínas amiloides bacterianas pueden influir en la dinámica de la microbiota intestinal in vitro y su potencial impacto en el SII. Además, ayudan a entender cómo estas proteínas afectan la proliferación de hongos como C. albicans, proporcionando una visión más clara sobre el papel de los amiloides producidos por bacterias de la microbiota en la salud intestinal.
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