A haptoglobina (Hp) que na espécie humana existe sobre dois polimorfismos genéticos (Hp1 e Hp2) tem um papel antioxidante imprescindível pela ligação à hemoglobina (Hb) livre resultante da hemólise dos glóbulos vermelhos, prevenindo o stresse oxidativo causado pela Hb livre intravascular. Por outro lado, a zonulina recentemente identificada como sendo a pré-haptoglobina (Hp-2), deu relevância aos níveis elevados de Hp encontrados no contexto de inflamação nas doenças inflamatórias crónicas (DIC). Esta possível associação assenta na capacidade menos eficiente da Hp2 se ligar à Hb, aumentando o stresse oxidativo induzido por esta e, consequentemente, gerando inflamação. A perda da função de barreira secundária à regulação positiva da zonulina permite o fluxo descontrolado de antigénios dietéticos e microbianos, devido ao aumento da permeabilidade intestinal. Assim, para o entendimento do papel destas substâncias no desenvolvimento e progressão das DIC pretende-se estudar, através do doseamento da Haptoglobina, zonulina e das respetivas variantes genéticas (Hp1 e 2), a suscetibilidade para o desenvolvimento e progressão da doença celíaca (DC) em indivíduos geneticamente suscetíveis. Para tal, será extraído DNA de leucócitos por método de salting out com avaliação da sua qualidade, determinação dos polimorfismos (por PCR-RFLP ou PCR tempo real) e fenotipagem da Hp1/2 por eletroforese e, posteriormente, elaborado um estudo estatístico do grau de associação entre os polimorfismos na DC comparando com controlos saudáveis de uma amostra da população. Contudo, face à situação de pandemia provocada pela SarsCov-2, a realização da componente laboratorial encontra-se comprometida, pelo que este trabalho consistirá, essencialmente, numa revisão sistemática da literatura existente.

The haptoglobin exists in the human species under two genetic polymorphisms (Hp1 and Hp2) and has a crucial antioxidant role for its connection to free hemoglobin (Hb), that results from hemolysis of red cells, preventing oxidative stress caused by free intravascular hemoglobin. Moreover, zonulin recently identified as pre-haptoglobin (Hp-2), gives a meaning to the higher levels of Hp found in the context of inflammation in chronic inflammatory diseases. This possible association is based on the less efficient capacity of Hp-2 binding to the hemoglobin, leading to oxidative stress induced by Hb and the generation of more inflammation. Loss of intestinal barrier function secondary to the upregulation of zonulin allows an uncontrolled flux of dietary and microbiologic antigens, provoked by an increase in intestinal permeability. To understand the role of these substances on the development and progression of inflammatory chronic diseases, I pretend to study from the assay of haptoglobin, zonulin and their allele frequency (Hp1 Hp2) concentration, the susceptibility for the development of celiac disease in individuals genetically predisposed. DNA will be extracted from leukocytes by salting out method with quality evaluation and polymorphism determination (by PCR-RFLP or real time-PCR) and phenotyping Hp1/2 by electrophoresis and, subsequently, analyze statistically all data between the grade of association between the polymorphisms presents in celiac disease patients and healthy control patients. However, due to the actual pandemic season by SarsCov-2 the laboratory component of this work is now compromised, whereby this work will be a systemic review of existent literature.

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2021