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Avaliação da expressão da metaloproteinase de matriz-9 e da molécula de adesão caderina-E nos mastocitomas caninos

Authors: Sousa, Cátia Isabel Ferreira de;

Avaliação da expressão da metaloproteinase de matriz-9 e da molécula de adesão caderina-E nos mastocitomas caninos

Abstract

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária, Ciências Veterinárias O mastocitoma canino encontra-se entre as neoplasias cutâneas mais frequentes no cão. Apresenta um comportamento biológico significativamente variável podendo tanto comportar-se como um tumor benigno como crescer e metastizar. Têm sido desenvolvidos métodos para vaticinar o comportamento biológico deste tumor. Esses métodos estão assentes em critérios da gradação histológica. No entanto, outros métodos têm sido testados como potenciais marcadores de prognóstico na tentativa de prever com maior fiabilidade o comportamento desta neoplasia. Estes métodos incluem marcadores de proliferação celular (AgNORs, PCNA e Ki-67) e marcadores de expressão do gene supressor tumoral como p53. As metaloproteinases de matriz (MMP) são um importante grupo de enzimas proteolíticas responsáveis pela degradação da matriz extracelular. A sua expressão é encontrada tanto na renovação fisiológica da matriz extracelular como em processos patológicos como é o caso da invasão tumoral e desenvolvimento de metástases. A MMP-9 é um dos membros desta família que se encontra mais bem estudada a nível tumoral, tanto em medicina veterinária como em medicina humana, e tem sido associada à capacidade invasiva de neoplasias. A caderina-E é uma molécula de adesão celular com um importante papel na morfogénese e manutenção da arquitetura tecidular normal. A diminuição da sua expressão em diversas neoplasias tem vindo a ser associada a um tumor fenotipicamente mais agressivo. A expressão da MMP-9 e da caderina-E está descrita nos mastocitomas caninos. No entanto, não existem estudos que revelem associação entre elas. Neste estudo, com o objetivo de avaliar a possível existência da referida associação, foram utilizadas 30 neoplasias, classificadas como mastocitomas de diferentes graus e pertencentes ao arquivo do Laboratório de Histologia e Anatomia Patológica da Universidade de Trás-os-Montes e Alto-Douro. As amostras foram submetidas à técnica de imunohistoquímica com os anticorpos anti-MMP-9 e anti-caderina-E. A imunomarcação da MMP-9 foi avaliada apenas quanto à extensão de marcação em 50% dos mastócitos marcados. A imunomarcação da caderina-E foi avaliada quanto à extensão de marcação em 50% das células marcadas, e quanto à intensidade de marcação em fraca, moderada e forte. A intensidade de marcação da caderina-E revelou associação com o grau histológico do tumor (p=0,034), assim como a extensão de marcação da MMP-9 (p=0,039). Pelo contrário, a extensão de marcação da caderina-E não revelou qualquer associação com o grau histológico do mastocitoma (p=0,552). Ao comparar a extensão de marcação da MMP-9 com a intensidade de marcação da caderina-E não foi encontrada uma associação estatisticamente significativa (p=0,270). O mesmo se verificou na associação entre a extensão de marcação da MMP-9 e a extensão de marcação da caderina-E (p=0,627). Este estudo sugere o envolvimento da MMP-9 na progressão e malignidade de mastocitomas cutâneos caninos, assim como o envolvimento da caderina-E na manutenção da integridade tecidular atuando como um agente supressor tumoral. Mast cell tumours are among the most common cutaneous tumours in the dog. Its biological behaviour is significantly variable, as it can be benign or malignant. Various methods have been developed to predict said behaviour. These methods are based in histological grading criteria. However, other techniques have been tested as potential prognostic markers in an attempt to improve the prediction of the behaviour of this neoplasia. These techniques include cell proliferation markers (AgNORs, PCNA e Ki-67) and markers of the expression of tumour suppressor genes, such as p53. The matrix metalloproteinases (MMPs) are an important group of proteolytic enzymes responsible for the degrading of the extracellular matrix. Their expression is found both in the physiological renovation of the extracellular matrix and in pathological situations, such as tumour invasion and development of metastasis. MMP-9 is one of the best studied members of this family, both in veterinary and human pathology, and has been associated to a tumour’s invasive ability. E-Cadherin is an adhesion molecule with an important role in morphogenesis and maintenance of normal tissue architecture. A decrease in its expression in various tumours has been linked to a phenotypically more aggressive tumour. The expression of MMP-9 and E-Cadherin is described in canine mast cell tumours. However, there are no studies demonstrating an association between them. In this study, with the objective of evaluating the possible existence of said association, we used 30 tumours from the archive of the Laboratory of Histology and Pathological Anatomy of the University of Trás-os-Montes and Alto Douro, diagnosed as mast cell tumours of different grades. The samples were submitted to the immunohistochemistry technique with the antibodies anti-MMP-9 and anti-E-Cadherin. The immunostaining of the MMP-9 was evaluated regarding only its extent in 50% of stained mast cells. The immunostaining of the E-Cadherin was evaluated regarding its extent in 50% of stained cells, and concerning its intensity in weak, moderate or strong. The intensity of staining of the E-Cadherin demonstrated an association with the histological grade of the tumour (p=0,034), as well as with the extent of the staining of the MMP-9 (p=0,039). On the contrary, the extent of the staining of the E-Cadherin didn’t reveal any association with the histological grade of the mast cell tumours (p=0,552). Comparing the extent of the MMP-9 staining with the intensity of the E-Cadherin staining, we didn’t find any statistical significant association between them (p=0,270). The same occurred when evaluating the association between the extent of the MMP-9 staining with the extent of the E-Cadherin staining (p=0,627). This study suggests the participation of MMP-9 in the progression and malignancy of canine mast cell tumours, as well as the contribution of E-Cadherin in maintenance of tissue integrity, acting as a tumour suppressor agent.

Keywords

Mastocitoma cutâneo, Cães, E-Caderinas, Técnicas histológicas, 616.5-006-091.8(043), Metaloproteínase 9 da matriz, 636.7.09(043), Imunohistoquímica

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