A venda de comida de rua é um importante pilar da restauração e denota-se pelo fornecimento de grande número de refeições a baixo custo, tornando-se acessível à maior parte da população. É, por isso, de extrema importância que as condições de higiene e segurança alimentar sejam asseguradas. Este estudo teve como objetivo avaliar os conhecimentos e as práticas de higiene e segurança alimentar de manipuladores de alimentos no setor de comida de rua na região do Grande Porto. Os dados foram recolhidos através de um questionário estruturado aplicado aos manipuladores de alimentos e de uma lista de verificação preenchida por observação direta das condições de higiene das instalações e práticas do manipulador. Foram reunidos dados de 30 manipuladores de alimentos e respetiva unidade de venda ambulante. A amostra era maioritariamente constituída por indivíduos do sexo feminino (56,7%) com uma média de idades de 35,10±9,31 anos. A maioria dos produtos comercializados (93,3%) eram hambúrgueres e cachorros, e farturas No geral, os manipuladores de alimentos revelaram um elevado nível de conhecimentos de higiene e segurança alimentar. A maioria dos manipuladores referiu aplicar sempre boas práticas de higiene e segurança alimentar na sua atividade profissional. No entanto, durante a observação direta das práticas dos manipuladores verificou-se que as boas práticas de higiene e segurança alimentar nem sempre são cumpridas, nomeadamente na higiene pessoal. Este estudo demonstrou que o nível de conhecimento de higiene e segurança alimentar da amostra era elevado, no entanto, revelou uma disparidade entre as práticas executadas e os conhecimentos adquiridos.