
handle: 10272/25758
Se ha planteado como indicador la infestación por Demodex folliculorum (DF) en diferentes enfermedades de los párpados y la superficie ocular. El objetivo de la tesis doctoral ha sido evaluar la presencia y densidad del ácaro en el área interpalpebral mediante reacción en cadena de polimerasa (PCR), en comparación con la microscopía óptica como método de referencia, para valorar la posible relación entre la presencia y densidad del parásito y la blefaritis. Método. Se analizaron 194 ojos (148 casos y 46 controles) de pacientes diagnosticados de blefaritis mediante examen periocular y palpebral (casos) y pacientes similares en edad, sexo y región demográfica sin patología (controles). Evaluándose síntomas, grado blefaritis y disfunción de las glándulas de Meibomio. Excluyéndose a pacientes con cirugía ocular previa (últimos 6 meses) y tratamiento con medicación ocular tópica y/o sistémica (último mes) y los que no firmaron consentimiento informado. Para la detección y cuantificación de DF se utilizaron dos técnicas a modo comparativo: conteo directo mediante microscopía óptica como método de referencia y cuantificación del ADN mediante PCR a tiempo real. Se realizó un estudio prospectivo unicéntrico e intervencional en los pacientes con demodicosis confirmada. Ante la falta de normalidad de los datos para su análisis se emplearon pruebas estadísticas no paramétricas. Para evaluar la eficacia de los tratamientos empleados y los cambios en la densidad de DF a lo largo del tiempo se realizó un análisis longitudinal, utilizándose la prueba de Wilcoxon con muestras pareadas para realizar comparaciones antes y después del tratamiento en cada paciente; y Kruskal-Wallis para comparar la eficacia global de los diferentes escalones terapéuticos. Así como comparaciones por pares entre los escalones terapéuticos, utilizando la prueba de la U de Mann-Whitney con el fin de identificar diferencias específicas entre cada uno de ellos. Considerándose un nivel de significancia de p<0.05. Resultados. De los 148 ojos del grupo de casos, 52 tenían blefaritis anterior, 52 blefaritis mixta y 44 blefaritis posterior. En los casos la prevalencia de DF fue del 40%, mientras que entre los controles del 10%, diferencia significativa (p<0.01 en ambos) mediante la técnica de microscopía óptica. En relación al número de copias de ADN, el grupo con patología presentó una media significativamente mayor (11958.22; SD=27792.24) respecto al grupo sin patología observable (5461.68; SD=14964.22), con un estadístico de prueba de 4220.50 (p<0.001). Asimismo, la carga de DF mediante microscopía fue notablemente más alta en el grupo con patología (media=1.10; SD=2.05) frente al grupo sin patología (media=0.15; SD=0.51), con un estadístico de prueba de 4385.00 (p<0.001). La blefaritis mixta presentó los valores más elevados tanto en número de copias de ADN como en número de DF, seguida por la blefaritis anterior. Así mismo, el número de copias de ADN según la gravedad de la blefaritis muestra valores crecientes desde los casos leves hasta los severos (p<0.001), pero la carga de DF, aunque los valores también aumentan con la gravedad, las diferencias no alcanzaron significación estadística (p=0.76). En los resultados obtenidos mediante PCR se observa una mayor densidad en mujeres (p=0.013), no evidente mediante la técnica de visualización directa (p=0.743). El índice de parasitación es significativamente mayor en pacientes mayores de 59 años, encontrando diferencias significativas tanto en el número de copias de ADN como en el número DF observados por microscopía (p<0.05 en ambos casos). En una segunda fase del estudio se analizaron 118 muestras oculares, antes y después del tratamiento específico frente al parásito, apreciando diferencias significativas en el número de copias de ADN entre la primera y segunda visita (p<0.001). Sin embargo, no se encuentran estas diferencias en el número de DF mediante microscopía (p=0.453). Es observable diferencias significativas en el número de copias de ADN en los pacientes con gravedad moderada (p=0.006) y severa (p=0.044) después de realizar el tratamiento. Conclusiones. La PCR cuantitativa en tiempo real se ha mostrado mucho más sensible que el método estándar de conteo mediante microscopía óptica para la detección y cuantificación de Demodex folliculorum. Se ha observado asociación entre Demodex folliculorum y la blefaritis mixta y anterior; así como también con la gravedad de la blefaritis, existiendo mayor densidad en la blefaritis moderada y grave. Los protocolos de tratamiento disminuyeron significativamente la densidad de Demodex folliculorum en la blefaritis moderada y grave.
Blepharitis, Blefaritis, 32 Ciencias Médicas, Reacción en Cadena de la Polimerasa, Demodex folliculorum, Polymerase Chain Reaction
Blepharitis, Blefaritis, 32 Ciencias Médicas, Reacción en Cadena de la Polimerasa, Demodex folliculorum, Polymerase Chain Reaction
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