La técnica de fijación de [35S]GTPγS permite evaluar la funcionalidad de una amplia mayoría de receptores acoplados a proteínas Gi/o. Sin embargo la aplicabilidad de este método para receptores acoplados a proteínas Gq, como es el caso del receptor 5-HT2A, es todavía bastante limitada. En este trabajo hemos optimizado y caracterizado la estimulación de la fijación específica de [35S]GTPγS mediada por la activación del receptor de serotonina 5-HT2A en homogeneizados de membrana y en secciones tisulares de cerebro de rata. El agonista 5-HT2A selectivo TCB-2 (4-Bromo-3,6-dimetoxibenzociclobuten-1-yl)metilamina hidrobromuro) estimuló la fijación específica de [35S]GTPγS de forma concentración-dependiente con una Emax= +50.9±4.8 y una potencia del orden nM (pEC50=6.2±0.1) en membranas procedentes de estriado de rata. Este estímulo fue inhibido, de forma estadísticamente significativa, en presencia del antagonista 5-HT2A selectivo MDL11939 (10 µM) (Emax=+36.2±3.5; p< 0.05, Student t-test), mientras que el antagonista 5-HT2C selectivo SB206552 (10 µM) no antagonizó dicho efecto. Teniendo en cuenta que el receptor 5-HT2A se expresa en densidades elevadas en corteza y en los ganglios basales, estas áreas se han seleccionado para realizar un estudio mas detallado de la caracterización de la fijación específica de [35S]GTP¿S en secciones cerebrales. El agonista TCB-2 (100 [Mu]M) produjo un estímulo de la fijación específica de [35S]GTPγS en la corteza prefrontal medial (Emax = +78.2±12.6), corteza frontal (Emax= +45.8±17.6), núcleo caudado-putamen (Emax=+26.0±7.6) y el núcleo accumbens (Emax=+19.1±4.0) entre otras áreas. De forma similar a lo observado en los estudios en membranas, el MDL 11939 (10 [Mu]M) antagonizó el efecto del TCB-2 en todas las áreas analizadas. En conclusión, este estudio refleja que el agonista TCB-2 representa una buena herramienta farmacológica para evaluar el acople a proteínas G de los receptores 5-HT2A.

Trabajo presentado al XIII Congreso de la Sociedad Española de Neurociencia celebrado en Tarragona del 16 al 19 de septiembre de 2009.

Financiado por el Ministerio de Ciencia e Innovación (SAF07-61862) y Fundación Alicia Koplowitz.

Peer Reviewed