La presencia de bacteriófagos que infectan a los cultivos iniciadores en las fermentaciones lácteas supone un problema de gran relevancia, al dar lugar a fermentaciones fallidas o de mala calidad. Es constante, por tanto, la búsqueda de cepas resistentes a fagos. En experimentos de evolución adaptativa en presencia de la bacteriocina lactococcina 972 se seleccionaron clones de Lactococcus lactis resistentes a dicha bacteriocina que, por el contrario, resultaron ser más sensibles a fagos de tipo c2 (Ceduovirus) que sus ancestros. Todos ellos comparten la pérdida de un plásmido de 41 kb (p41) que codifica un posible exopolisacárido, aunque la presencia de otras mutaciones adicionales no permitió asociar de forma directa esta pérdida con el fenotipo de sensibilidad a fagos. En este trabajo estudiamos la infección por el fago c2 del clon L. lactis (IPLA1064- WT) y sus derivados (C11 y E11), confirmando una mayor sensibilidad tanto en medio sólido (eficiencia de plaqueo) como en medio líquido (porcentaje de inhibición). Determinamos, además, diferencias significativas en el porcentaje de adsorción, con valores del 40 % en la cepa parental y del 75 % en las derivadas. Finalmente, empleando el sistema CRISPR-Cas9, eliminamos de forma selectiva el plásmido p41. En este mutante, la eficiencia de plaqueo resulta equiparable a la obtenida en los derivados C11 y E11. Estos resultados confirman la implicación de este polisacárido en el bloqueo de la infección de L. lactis por Ceduovirus, al bloquear su adsorción, y abren la puerta a futuros trabajos que permitan profundizar en sus propiedades físico-químicas y tecnológicas.

Resumen del trabajo presentado en la VIII Reunión FAGOMA Red Española de Bacteriófagos y Elementos Transductores, celebrada en Valencia (España), del 2 al 4 de octubre de 2024

PID2020-119697RB-I00 (MCIN/AEI/10.13039/501100011033); AYUDAS SEVERO OCHOA (BP20 006); AYUDAS CESAR NOMBELA (CN-SEM2024-005)