Introducción: La enfermedad del hígado graso no alcohólico afecta al 25% de la población adulta y es en la actualidad la enfermedad hepática más común en el mundo. Su forma más progresiva, la esteatohepatitis no alcohólica (EHNA), se caracteriza por la presencia de daño a los hepatocitos, fibrosis e inflamación. Las células NKT dependientes de CD1d abarcan dos tipos celulares diferenciados, las células iNKT, o NKT invariantes, y las células NKT de tipo II, con características inmunomoduladoras distintas. En general, las células iNKT parecen contribuir a la inflamación hepática, mientras que las células NKT tipo II son protectoras. En el contexto de la EHNA, el papel de las células NKT dependientes de CD1d es controvertido, ya que se han descrito observaciones contradictorias. Métodos: Ratones salvajes (WT) o deficientes en CD1d (CD1dKO) de 6-8 semanas, machos y hembras de la cepa BALBc, fueron alimentados 6 semanas con dieta alta en grasa (60% kcal) con restricción de metionina y deficiencia en colina (HFCD) para inducir EHNA. El contenido de colágeno se midió mediante determinación de hidroxiprolina y tinción con Sirius Red seguido de cuantificación del software de imagen. La activación de HSC, la inflamación hepática y la producción de citoquinas se midieron mediante qPCR y western blot. Resultados: La dieta HFCD indujo un daño hepático (aumento de ALT) acompañado de esteatosis, fibrosis e inflamación significativas tanto en ratones WT como en los ratones CD1d-KO. Al analizar, tras el periodo de administración de dieta HFCD, el cociente peso del hígado/peso corporal éste era significativamente inferior en los ratones CD1d-KO frente a los ratones WT. La dieta HFCD indujo un aumento de los depósitos de triglicéridos y colesterol intrahepáticos tanto en animales WT como en CD1d-KO. Mientras que los niveles de triglicéridos eran similares en ambos grupos, los niveles de colesterol eran superiores en los animales CD1d-KO vs WT+HFCD. Todas estas características fueron comunes para ratones hembras y machos deficientes en CD1d. Sin embargo, al analizar los parámetros referentes a fibrosis e inflamación encontramos claras diferencias entre sexos. Los CD1d-KO machos mostraron una presencia de fibras de colágeno acompañada de una mayor expresión de a-SMA y COL1A1 mRNA respecto a los machos WT+HFCD. Paralelamente, los ratones macho CD1d-KO+HFCD mostraron un claro incremento de la expresión de genes inflamatorios IL-6, MCP-1 y una disminución del gen anti-inflamatorio IL-10 respecto a los machos WT. Por el contrario, ratones hembra deficientes en CD1d +HFCD mostraron unos parámetros de fibrosis e inflamación similares a las hembras WT con dieta. Conclusiones: La ausencia de células NKT agrava la EHNA en ratones macho. La disparidad de resultados entre ambos sexos resalta la importancia de realizar estudios comparativos de género particularmente en patologías hepáticas donde las NKTs puedan hallarse involucradas.

Este trabajo de investigación ha sido financiado con las subvenciones PI16/00930 para M.M. concedidas por el Instituto de Salud Carlos III y SAF2015-66515-R para A.M., Ministerio de Economía y Competitividad, y co-financiado por el FEDER (Fondo Europeo de Desarrollo Regional, Unión Europea).

Trabajo presentado en el 44º Congreso Anual de la Asociación Española para el Estudio del Hígado (AEEH), celebrado en Madrid (España), del 20 al 22 de febrero de 2019