La encina, Quercus ilex L., una de las Fagáceas más representativas del bosque Mediterráneo, sufre un decaimiento progresivo, debido entre otras causas, a la enfermedad conocida como "la seca". Esta problemática ha provocado una reducción de sus masas forestales originando un problema ambiental grave que amenaza su sostenibilidad. El objetivo del trabajo es el establecimiento y mantenimiento in vitro de cultivos de encina, mediante la proliferación de yemas axilares y posterior utilización de hojas y ápices de los brotes micropropagados como explantos iniciales para inducir embriones somáticos (ES), como vía eficaz para la multiplicación rápida de individuos seleccionados. Se han recogido estacas (25-30 cm) de la copa de ocho encinas seleccionadas en Quintos de Mora (Toledo), genotipos Q2, Q3, Q6, Q7, Q8 y Q10 y en el Encín (Alcalá de Henares), genotipos E00 y E2. Las estacas se trataron con fungicida y se sometieron a brotación forzada en condiciones controladas. Los nuevos brotes se esterilizaron con aplicación sucesiva de etanol de 70% y diferentes concentraciones/tiempos de hipoclorito sódico; seguidamente se seccionaron segmentos nodales que fueron establecidos in vitro. El proceso de esterilización fue crítico, siendo necesario la eliminación del etanol y el uso de concentraciones/tiempos bajos de hipoclorito (0.3% de cloro libre 2-3 min.) para conseguir el crecimiento in vitro de estos genotipos. Las tasas de contaminación oscilaron entre 0-8%. Según el genotipo, entre 11-70% de los explantos respondieron positivamente formando brotes. La estabilización de los cultivos se ha logrado en seis de los ocho genotipos seleccionados permitiéndonos utilizarlos como fuente de explantos para la inducción embriogénica. Los primeros estudios realizados con material del Q3 y Q10 mostraron la posibilidad de inducir ES en ápices caulinares cultivados en medios sin reguladores de crecimiento o adicionados con AIA o ANA en combinación con BA, con tasas del 2-4% de inducción.

Se agradece al Dr. M. Toribio el suministro del material vegetal utilizado en este trabajo. Este trabajo fue parcialmente financiado por el MINECO (España) mediante el proyecto AGL2013-47400-C4-3R.

Trabajo presentado en la XI Reunión de la Sociedad Española de Cultivo in vitro de Tejidos Vegetales, celebrada en Valencia (España), los días 3 y 4 de septiembre de 2015

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