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El uso de la embriogénesis somática repetitiva permite la proliferación de embriones somáticos y el mantenimiento del potencial embriogénico. En este estudio se investigaron los efectos de los reguladores del crecimiento (auxinas y/o citoquininas] del medio de proliferación de embriones y del sistema de cultivo (medio semisólido o estándar frente a inmersión temporal] con el fin de mejorar las tasas de multiplicación y la calidad de los embriones somáticos de dos líneas embriogénicas de Quercus robur derivadas de árboles adultos (San-José et al.. 20101· Los reguladores del crecimiento tuvieron un efecto significativo en el proceso de embriogénesis repetitiva, obteniéndose mayores tasas de multiplicación (en base al número total de embriones y número de embriones en fase cotileclonar] con el medio suplementado con benciladenina (0.44 !-1M]mientras que la producción de embriones se reclujo significativamente cuando el medio contenía ácido naftalenacético (0,27 !-1M]como único regulador. Los sistemas de inmersión temporal (TIS] constituyen un método eficaz para la automatización de la embriogénesis somática (Etienne y Berthouly, 2002] y su aplicación a los sistemas embriogénicos de roble se desarrolló en este estudio. En los experimentos de proliferación embriogénica en condiciones de TIS se evaluó la aplicación de cuatro ciclos con inmersiones de un minuto cada 6, 8, 12 Y24 horas, comparándolas con el cultivo en medio semisólido. En general. la inmersión temporal mejoró la proliferación y la calidad de los embriones somáticos. Los ciclos de inmersión de un minuto cada B o 12 horas resultaron ser los que produjeron una mayor sincronización del proceso. con una producción aproximada del 90% de los embriones somáticos en fase cotiledonar, junto con un incremento de la biomasa total y de la tasa de multiplicación. También se observó un efecto genotípico en la respuesta proliferativa de ambas líneas embriogénicas tanto con el sistema de cultivo estándar como con el sistena de inmersión temporal. Los embriones proliferados mediante el sistema de inmersión temporal mantuvieron la capacidad germinativa. obteniéndose tasas de conversión en plántula similares al método estándar.
Trabajo presentado en la IX Reunión de la Sociedad Española de Cultivo in vitro de Tejidos Vegetales (2011), celebrada en Puerto de la Cruz, Tenerife (España), del 26 al 29 de abril de 2011
R. Mallón es investigador postdoctoral contratado del programa JAE-Ooc (CSIC).Esta investigación ha sido parcialmente financiada por la Xunta de Galicia mediante el proyecto 09MRU002400PR .
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