[ES]: Las proteínas de la familia Sos (Son of Sevenless), formada por dos miembros, Sos1 y Sos2, funcionan como activadores de GTPasas Ras catalizando el intercambio de GDP por GTP. Estas proteínas actúan como conectores entre la estimulación de los receptores tirosina quinasa y la activación de Ras en rutas de señalización intracelular. Ambas presentan un patrón de expresión ubicuo y una estructura de dominios funcionales muy parecida. Sin embargo, los estudios realizados hasta el momento apuntan a que desempeñan funciones específicas, revelando un papel esencial de Sos1 en el desarrollo embrionario, en contraste con la dispensabilidad de Sos2. Teniendo en cuenta que apenas existen estudios comparativos, decidimos realizar una caracterización genómica y funcional de MEFs derivados de ratones knockout para Sos1 y Sos2. En primer lugar, identificamos el perfil transcripcional dependiente de cada isoforma mediante el uso de microarrays de expresión. Asimismo, estudiamos el efecto de la eliminación de Sos1 y Sos2 en las rutas de señalización mediadas por Ras, así como en la capacidad proliferativa y la supervivencia celular. Por último, comparamos y validamos los resultados obtenidos utilizando fibroblastos embrionarios con silenciamiento estable de Sos1 o Sos2 mediante shRNA. Nuestros resultados han revelado que Sos1, a diferencia de Sos2, ejerce un papel importante en la regulación de la expresión génica. Asimismo, la ausencia de las proteínas Sos, principalmente Sos1, resulta en una reducción de la tasa proliferativa, un incremento del ROS intracelular, e inesperadamente, un aumento de la fosforilación en la mayoría de proteínas efectoras analizadas.

[EN]: The family proteins Sos (Son of Sevenless), consisting of two members, SOS1 and SOS2 function as activators of Ras GTPases by catalyzing the exchange of GDP for GTP. These proteins act as connectors between the stimulation of receptor tyrosine kinase and Ras activation in intracellular signaling pathways. Both have a ubiquitous expression pattern and functional domain structure very similar. However, studies to date suggest that perform specific functions, revealing an essential role in embryonic development Sos1, in contrast to the dispensability of SOS2. Given that only comparative studies, we decided to perform a functional characterization of genomic and MEFs derived Sos1 knockout mice and SOS2. First, we identify the profile of each isoform dependent transcriptional using microarray expression. We also study the effect of removing and SOS2 Sos1 in signaling pathways mediated by Ras and in proliferative capacity and cell survival. Finally, compare and validate the results obtained using embryonic fibroblasts with stable silencing by shRNA Sos1 or SOS2. Our results have shown that Sos1, unlike SOS2, plays an important role in regulating gene expression. Also, the absence of Sos proteins, mainly Sos1, resulting in a reduced proliferative rate, an increase of intracellular ROS, and unexpectedly, an increased phosphorylation of the majority of effector proteins analyzed.

Esta memoria ha sido realizada siendo Alicia Ginel-Picardo beneficiaria de una beca FPU del Ministerio de Educación y Ciencia para la realización de la tesis doctoral (2005- 2008). La investigación en el laboratorio ha sido financiada por los siguientes proyectos: -Red Temática de Investigación Cooperativa en Cáncer, Centro de Investigación del Cáncer de Salamanca-IBMCC (USAL/CSIC). Fundación de Investigación del Cáncer (Cod. 1556). Ministerio de Sanidad. Fondo de Investigación Sanitaria (2007-2009). IP, E.>Santos. - Mecanismos de activación de oncoproteínas Ras: Análisis de especificidad funcional de dianas Ras y sus activadores GEF en procesos fisiológicos y patológicos. Ministerio de Sanidad. Fondo de Investigación Sanitaria (2007-2009). IP, E. Santos. -Estudios de especificidad funcional de oncoproteinas Ras y sus activadores celulares. Junta de Castilla y León (SA044A08) (2008-2010). IP, E. Santos. -Especificidad funcional de proteinas ras y sus activadores GEF en procesos fisiologicos y patologicos. Junta de Castilla y León GR93, Grupos de excelencia de Castilla y Leon (2008-2010). IP, E. Santos. -Mecanismos de especificidad funcional de oncoproteínas Ras y sus activadores celulares específicos GEF en procesos fisiológicos y patológicos. Fondo de Investigaciones Sanitarias. (Proyecto Intrasalud cPS09/01979 (2010-2013). IP, E. Santos.

Memoria presentada por Alicia Ginel Picardopara optar al grado de Doctor por la Universidad de Salamanca y realizada en el Instituto de Biología Molecular y Celular del Cancer de Salamanca.

Peer Reviewed