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DIGITAL.CSIC
Conference object . 2015 . Peer-reviewed
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Detección de la resistencia antihelmíntica mediante pirosecuenciación del gen de la β- tubulina en cepas de campo de nematodos gastrointestinales

Authors: Esteban-Ballesteros, Myriam; Rojo Vázquez, Francisco Antonio; Martínez Pérez, José Manuel; Robles Pérez, D.; González Lanza, Camino; Martínez Valladares, María;

Detección de la resistencia antihelmíntica mediante pirosecuenciación del gen de la β- tubulina en cepas de campo de nematodos gastrointestinales

Abstract

La resistencia antihelmíntica (RA) a los bencimidazoles en nematodos gastrointestinales de los ovinos está asociada con un polimorfismo de un solo nucleótido (SNP) en el codón 200 del isotipo 1 del gen de la β-tubulina. El mismo SNP se ha relacionado con resistencia a la ivermectina (IVM). En este trabajo hemos comparado los niveles de RA mediante la reducción de huevos en heces (FECRT) y el porcentaje de alelos resistentes obtenido por pirosecuenciación. Se estudiaron 10 rebaños donde se hicieron 3 grupos de 10 animales: dos tratados (con albendazol (ABZ) y con IVM), y uno control. Se recogieron heces los días 0 y 14 post-tratamiento para cuantificar la eliminación de huevos y recuperar L3 para extraer ADN. Tras amplificar por PCR los fragmentos del gen relacionados con la RA en Trichostrongylus colubriformis y Teladorsagia circumcincta, se realizó la pirosecuenciación. Según el FECRT, 8 granjas fueron susceptibles y una sospechosa de resistencia tras el tratamiento con ABZ. En T. circumcincta no se encontró el alelo resistente en proporción alta ni antes (0-3,4%) ni después (0-23,8%) del tratamiento. En T. colubriformis, el SNP resistente se encontró con una frecuencia de 51,6 y 48,5% antes del tratamiento en 2 granjas susceptibles, y en el resto con frecuencia baja (0-3,1%). Tras el tratamiento la frecuencia ascendió a 89,8-99,3% en 6 granjas. En cuanto a la IVM, hubo 3 granjas resistentes, una sospechosa y 5 susceptibles por FECRT. En T. circumcincta el alelo se encontró en proporción muy baja antes y después del tratamiento (0-6,1%). En T. colubriformis, antes del tratamiento, el alelo resistente estaba presente en 2 de las granjas susceptibles (51,6-87,8%), y la frecuencia fue baja en el resto (0-3,1%). Después del tratamiento los porcentajes del SNP variaron entre 23,3 y 100% en todas las granjas. Según estos resultados, aunque el SNP 200 podría asociarse a la RA podrían intervenir otros genes.

Trabajo presentado al XIX Congreso de la Sociedad Española de Parasitología. Apartado Comunicaciones: Parasitología estructural y molecular).-- II Encuentro Internacional de Parasitólogos de España, Francia, Italia y Portugal (Vitoria, Gasteiz, 23-25 de julio, 2015).

Trabajo financiado por proyecto INIA Ref. RTA2013-00064-C02-02

Peer reviewed

Country
Spain
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