La Metabolómica ha visto un gran desarrollo en la última década. El principal objetivo de esta disciplina es el análisis completo de los compuestos endógenos de bajo peso molecular en un sistema biológico. Actualmente, las plataformas analíticas basadas en espectrometría de masas (MS) aportan una mayor sensiblidad que aquellas basadas en NMR. Por lo general el análisis por MS viene precedido de una separación previa de los metabolitos con el objetivo de evitar los efectos negativos de la matriz de la muestra biológica. En este sentido, el acoplamiento electroforesis capilar-MS (CE-MS) se emplea cada vez más en estudios metabolómicos, fundamentalmente para el análsis de metabolitos polares e iónicos. La separación de metabolitos polares aniónicos presenta ciertas dificultades mediante CE-MS , ya que para la separación de este tipo de compuestos en tiempos de análisis cortos es necesario trabajar en modo de polaridad negativa en CE, con las consecuencias adversas (en términos de estabilidad de corriente) que supone un flujo electroosmótico que no se mueve hacia el MS, si no que lo hace en el sentido contrario. Con el fin de estabilizar y/o invertir el flujo electroosmótico y así evitar tiempos de análsis largos y problemas de inestabilidad de la corriente en el interior del capilar de separación, en este trabajo se propone un nuevo recubrimiento polimérico de la pared interna del capilar, basado en la adsorción física del copolímero Poly(TN-co-dimetilacrilamida), siendo TN una unidad monomérica portadora de una cadena lateral dendrónica derivada del ligando TEDETA (N,N,N’,N’-tetraetildietilenotriamina), que incluye tres aminas terciarias. Este polímero dendrónico interacciona con los grupos silanol ionizados de la pared interna del capilar dando lugar a un flujo electroosmótico dependiente del pH del electrolito de separación. El empleo de electrolitos de separación con valores de pH por debajo de 6 dan lugar a la inversión del flujo electroosmótico, es decir, con dirección hacia el ánodo. En condiciones de polaridad inversa en CE se consigue un flujo electroosmótico estable hacia el detector MS, además de una buena selectividad de los metabolitos polares aniónicos en tiempos de análsisis cortos (menos de 15 minutos). La utilidad de este nuevo método CE-MS se ha evaluado en el análsis del perfil de metabolitos polares aniónicos en células de cáncer de cólon (HT-29).

Proyecto MAT-2010-20001. R.N. agradece la ayuda postdoctoral JAE-doc cofinanciada por el CSICy el Fondo Social Europeo (ESF).

Trabajo presentado a las I Jornadas Científicas del CIAL celebradas el 5 de junio de 2014 en Madrid.

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