A qualidade de ar interior em ambientes geriátricos é um dos fatores mais críticos para o conforto e saúde dos residentes desses espaços. A presença de contaminantes gasosos e de agentes microbianos, conjugada com condições de ventilação deficitárias pode aumentar significativamente a vulnerabilidade dos ocupantes. Em ambientes interiores as principais fontes de poluição do ar são resultantes de atividades antrópicas internas e externas. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a qualidade de ar interior em três lares de idosos (A, B e C) localizados no nordeste de Portugal. Após a caracterização dos edifícios e da área envolvente procedeu-se à monitorização de parâmetros físico-químicos (temperatura, humidade relativa do ar, CO2, CO, e COV totais) e microbiológicos (bactérias e fungos) em três espaços interiores de cada lar (refeitório, sala de convívio, quarto duplo) e no exterior dos edifícios. As medições foram realizadas em dois períodos do dia (manhã e tarde) na estação de verão de 2017 e inverno de 2018. A monitorização dos parâmetros físico-químicos foi realizada com recurso a uma sonda Graywolf IQ 610, colocada a 1,5 metro do chão no centro do compartimento. A quantificação de bactérias e fungos envolveu a colheita de amostras em meio de cultura sólido através de um amostrador SAS (Surface Air System) e ainda através do método de sedimentação passiva. A identificação molecular dos microrganismos foi realizada por sequenciação da região 16S (para bactérias) e ITS (para fungos) dos genes RNAr. Globalmente as concentrações médias dos parâmetros físico-químicos (com exceção dos COVs totais), bem como dos bioaerossóis avaliados não excederam os padrões legislados. Nos três lares, Bacillus, Micrococcus e Staphylococcus foram os géneros bacterianos dominantes e Aspergillus, Cladosporium e Penicillium os géneros fúngicos. A diversidade de espécies, avaliada pelo índice de Shannon-Wiener, foi maior no verão. A análise de similaridade indicou que as espécies bacterianas e fúngicas que ocorrem no verão são significativamente diferentes das espécies de inverno. A análise de regressão linear e o teste de Spearman mostraram uma fraca associação entre os dois métodos de amostragem do ar (passivo e ativo), excetuando as bactérias no inverno (rs=0,77; p<0,001 e R2= 0,67; p<0,001). Os resultados obtidos neste estudo sugerem a necessidade de aprofundar o estudo da qualidade do ar nesses espaços, por se tratar de espaços ocupados por idosos que são mais suscetíveis a infeções.