O estudo das interações entre células e seu substrato na engenharia de tecidos é de grande importância para determinação das propriedades biológicas dos implantes. A adesão das células ao substrato influencia na morfologia, na proliferação e na viabilidade celular. Neste trabalho, foram avaliadas adesão, proliferação e viabilidade de fibroblastos de camundongo, linhagem L929, em suporte biopolimérico. Utilizaram-se membranas de celulose bacteriana como substrato para a avaliação in vitro. As células foram cultivadas sobre essas membranas em meio Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM), suplementado com 10% de Soro Bovino Fetal (SBF), a 37°C, contendo 5% CO2. Para monitorar e avaliar o comportamento dessas células em distintos tempos de cultivos nas membranas, escolheram-se diferentes parâmetros celulares. Com base nessa experiência, observaram-se diferenças morfológicas significativas nas células. Os resultados evidenciaram boa adesão, crescimento, proliferação e viabilidade das células nas membranas utilizadas.