Piper marginatum y Piper tuberculatum son especies conocidas en Ecuador y Latinoamérica por sus distintos usos etnobotánicos, sin embargo, los extractos de estas especies del país no cuentan con análisis que justifiquen sus aplicaciones. El presente trabajo analizó la actividad antimicrobiana, antioxidante, acaricida y larvicida de extractos etanólicos de P. marginatum y P. tuberculatum colectados en el occidente del Ecuador. La actividad antioxidante se analizó mediante el método de captación del radical libre 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH). La actividad larvicida se determinó frente al mosquito Aedes aegypti con el protocolo descrito por la Organización Mundial de la Salud (OMS). La capacidad acaricida se evaluó frente a la garrapata Rhipicephalus (Boophilus) microplus por la técnica de toxicidad por contacto. La actividad antimicrobiana fue determinada con el método de difusión en agar con discos frente a cepas de referencia. Ambos extractos alcanzaron un porcentaje de inhibición mayor a 70%. El extracto de P. tuberculatum obtuvo la mayor actividad larvicida y acaricida (CL50 de 16,51 ppm y 0,87 mg/mL respectivamente). El extracto de P. marginatum inhibió las cepas de Staphylococcus aureus (halos de inhibición de 13,70 mm y CIM 0,07 mg/mL) y Citrobacter freundii (halos de inhibición de 14,0 mm y CIM 0,63 mg/mL). Los extractos de P. marginatum y P. tuberculatum, podrían servir para el desarrollo de nuevos agentes biocidas y antioxidantes.