La prueba de alimentación es el diseño experimental más relevante en la investigación sobre nutrición de organismos acuáticos. Una planeación y desarrollo adecuados de una prueba de alimentación son esenciales para la obtención de resultados representativos de una respuesta biológica normal, para que posteriormente sean aplicados a la producción de organismos acuáticos. Asimismo, y considerando que en los últimos años se han establecido reglas internacionales para el trato humanitario y ético del uso de animales en experimentación, el presente trabajo tiene como objetivo principal acercar al alumnado a desarrollar un proyecto de investigación en la acuacultura con respecto al diseño y ejecución de pruebas de alimentación. La presente obra se ha dividido en cinco partes: (1) diseño y desarrollo de las pruebas de alimentación; (2) las condiciones ambientales más adecuadas para un manejo ético y humanitario de los organismos durante y al término de las pruebas; (3) definiciones de anestesia y anestésicos, su uso durante las biometrías y sacrificio para la obtención de muestras, disminuyendo el estrés y el sufrimiento innecesario de los organismos con los que se está experimentando; (4) obtención de muestras y (5) índices de crecimiento que pueden ser utilizados para evaluar rápidamente el efecto de un tratamiento sobre los organismos.