O presente estudo teve como objetivo determinar o efeito de dois diferentes sistemas de resfriamento (Equitainer® II e caixaisotermica comercial) sobre as caracteristicas do semen de caes apos 12 e 24 horas de conservacao em dois meios diluidores: meio minima contaminacao e meio lactose-gema modificado. Foram utilizados 15 ejaculados de cinco caes, que foramavaliados quanto a motilidade progressiva, vigor espermatico, patologia espermatica, porcentagem de espermatozoides vivos ecom membrana plasmatica integra. As amostras foram diluidas na proporcao de 1:3 nos meios de conservacao, armazenadasnos dois sistemas de transporte e analisadas apos 12 e 24 horas de resfriamento. Os resultados obtidos mostram que naohouve diferenca significativa de nenhuma das caracteristicas seminais das amostras conservadas no Equitainer® II e caixaisotermica comercial. Verifica-se que apos 24 horas de armazenamento houve um declinio significativo (P<0,05) de todas ascaracteristicas do semen independentemente dos meios ou unidades de conservacao. Porem, apos 12 horas de armazenamento,nao houve diferenca significativa da motilidade progressiva, vigor espermatico, porcentagem de espermatozoides vivos e patologiaespermatica entre o semen fresco e o conservado em lactose gema modificado, independentemente da unidade de conservacaoutilizada. O mesmo nao ocorreu no semen conservado no minima contaminacao, cujas caracteristicas, neste momento, foramdiferentes (P<0,05) daquelas observadas no semen fresco, com excecao da patologia espermatica. A integridade da membranaplasmatica foi a unica caracteristica que apresentou diferenca significativa (P<0,05) entre o semen fresco e o conservado por12 horas no meio lactose gema modificado. Conclui-se que o tipo de unidade de resfriamento utilizado nao influenciou ascaracteristicas seminais durante o periodo estudado, e que o tempo de 24 horas sob resfriamento influencia consideravelmenteas caracteristicas do semen, mas que apos 12 e 24 horas de conservacao, o meio lactose gema foi superior ao minimacontaminacao na manutencao da maioria dos parâmetros do semen.