Introducción: La tuberculosis bovina, causada por Mycobacterium bovis, es una zoonosis de alto impacto sanitario y económico. En Cochabamba (Bolivia) se han detectado casos en mataderos, pero se desconoce la situación en sistemas lecheros andinos fragmentados como Machajmarca, donde podrían existir condiciones propicias para la transmisión. Métodos: Estudio observacional transversal realizado en el primer semestre de 2023 en 180 bovinos (≥ 6 meses) de cinco comunidades del módulo lechero de Machajmarca. Se aplicó la Prueba Intradérmica Única (PIU) con tuberculina PPD bovina (0,1 ml) y medición del espesor cutáneo en pliegue ano-caudal antes y a las 72 ± 6 h, interpretando según criterios REGENSA. Se analizaron variables como edad, sexo y condición corporal. El análisis estadístico fue descriptivo, con comparación de medias mediante ANOVA (p < 0,05). Resultados: No se detectaron casos positivos (prevalencia aparente 0 %). Dos animales (1,1 %) fueron sospechosos y resultaron negativos en una reevaluación posterior. El estado corporal influyó significativamente en la reactividad cutánea: animales con condición óptima (EC = 4) mostraron un incremento medio de 0,60 mm frente a 0,25 mm en EC = 3 (p < 0,05). No se hallaron diferencias significativas por sexo o categoría productiva. El mayor incremento por edad se observó en bovinos de 91–100 meses (0,38 mm), sin correlación lineal significativa. Discusión: Los resultados confirman el estatus libre de TBB en Machajmarca, posiblemente asociado a la fragmentación de hatos, prácticas sanitarias y condiciones geográficas. Se valida un modelo de vigilancia participativa aplicable a sistemas lecheros andinos. Se recomienda implementar vigilancia activa anual, incluir técnicas moleculares y gestionar la certificación de “zona libre de TBB” para fortalecer la inocuidad y el acceso a mercados.