El subtipo H5N1 del virus de la gripe aviar (AIV) con una deleción de 20 aminoácidos en los residuos 49-68 en la región del tallo de la neuraminidasa (NA) se convirtió en un virus epidémico importante. Para determinar el efecto del truncamiento o la desglicosilación del tallo de NA sobre la virulencia, utilizamos la mutagénesis dirigida al sitio para insertar 20 aminoácidos en el virus de tallo corto A/mallard/Huadong/S/2005 (rSNA-20) para recuperar el virus de tallo largo (rSNA+). También se construyó una serie de virus de tallo corto o de tallo desglicosilado basándose en el virus de tallo largo, y luego se evaluaron las características y la patogenicidad de los virus resultantes. Los resultados mostraron que la mayoría de los virus de tallo corto o de tallo desglicosilado tenían placas más pequeñas, y un aumento de la estabilidad al calor y al pH bajo, y una disminución de la actividad de la neuraminidasa en comparación con el virusrSNA +. En un estudio de exposición a ánades reales, la mayoría de los virus de tallo corto o de tallo desglicosilado mostraron un aumento de las lesiones patológicas y los títulos de virus en los tejidos de los órganos y un aumento de la diseminación del virus en la orofaringe y la cloaca en comparación con el virus rSNA +, mientras que la mayoría de los virus de tallo corto, especialmente rSNA-20, mostraron una mayor patogenicidad que el virus de tallo desglicosilado. Además, los virus de tallo corto mostraron una expresión significativamente regulada al alza de los factores relacionados con el sistema inmunitario en los pulmones de los ánades reales infectados, incluidos IFN-α, Mx1 e IL-8. Los resultados sugirieron que el truncamiento o desglicosilación del tallo de NA aumenta la patogenicidad del subtipo AIV de H5N1 en ánades reales, lo que proporcionará una advertencia previa para la prevención y el control de la influenza aviar del subtipo H5N1 en las aves acuáticas.

Le virus de la grippe aviaire (AIV) de sous-type H5N1 avec une délétion de 20 acides aminés au niveau des résidus 49-68 dans la région de la tige de la neuraminidase (NA) est devenu un virus épidémique majeur. Pour déterminer l'effet de la troncature ou de la déglycosylation de la tige NA sur la virulence, nous avons utilisé la mutagenèse dirigée pour insérer 20 acides aminés dans le virus à tige courte A/colvert/Huadong/S/2005 (ARNr-20) pour récupérer le virus à tige longue (ARNr+). Une série de virus à tige courte ou à tige déglycosylée a également été construite sur la base du virus à tige longue, puis les caractéristiques et la pathogénicité des virus résultants ont été évaluées. Les résultats ont montré que la plupart des virus à tige courte ou à tige déglycosylée présentaient des plaques plus petites, une augmentation de la chaleur et une faible stabilité du pH, ainsi qu'une diminution de l'activité de la neuraminidase par rapport au virusARNr +. Dans une étude de provocation sur les canards colverts, la plupart des virus à tige courte ou à tige déglycosylée ont montré une augmentation des lésions pathologiques et des titres de virus dans les tissus des organes et une augmentation de l'excrétion de virus dans l'oropharynx et le cloaque par rapport au virus ARN +, tandis que la plupart des virus à tige courte, en particulier ARN-20, ont montré une pathogénicité plus élevée que le virus à tige déglycosylée. De plus, les virus à tige courte ont montré une expression significativement régulée à la hausse des facteurs immunitaires dans les poumons des canards colverts infectés, y compris IFN-α, Mx1 et IL-8. Les résultats suggèrent que la troncature ou la déglycosylation de la tige de NA augmente la pathogénicité du sous-type H5N1 AIV chez les colverts, ce qui fournira un avertissement préalable pour la prévention et le contrôle de la grippe aviaire de sous-type H5N1 chez la sauvagine.

H5N1 subtype avian influenza virus (AIV) with a deletion of 20 amino acids at residues 49-68 in the stalk region of neuraminidase (NA) became a major epidemic virus. To determine the effect of truncation or deglycosylation of the NA stalk on virulence, we used site-directed mutagenesis to insert 20 amino acids in the short-stalk virus A/mallard/Huadong/S/2005 (rSNA-20) to recover the long-stalk virus (rSNA+). A series of short-stalk or deglycosylated-stalk viruses were also constructed basing on the long-stalk virus, and then the characteristics and pathogenicity of the resulting viruses were evaluated. The results showed that most of the short-stalk or deglycosylated-stalk viruses had smaller plaques, and increased heat and low pH stability, and a decreased neuraminidase activity when compared with the virus rSNA+. In a mallard ducks challenge study, most of the short-stalk or deglycosylated-stalk viruses showed increased pathological lesions and virus titers in the organ tissues and increased virus shedding in the oropharynx and cloaca when compared with the rSNA+ virus, while most of the short-stalk viruses, especially rSNA-20, showed higher pathogenicity than the deglycosylated-stalk virus. In addition, the short-stalk viruses showed a significantly upregulated expression of the immune-related factors in the lungs of the infected mallard ducks, including IFN-α, Mx1, and IL-8. The results suggested that NA stalk truncation or deglycosylation increases the pathogenicity of H5N1 subtype AIV in mallard ducks, which will provide a pre-warning for prevention and control of H5N1 subtype avian influenza in the waterfowl.

أصبح فيروس إنفلونزا الطيور من النوع الفرعي H5N1 (AIV) مع حذف 20 حمضًا أمينيًا من المخلفات 49-68 في منطقة ساق النورامينيداز (NA) فيروسًا وبائيًا رئيسيًا. لتحديد تأثير اقتطاع أو انحلال ساق الحمض النووي على الفوعة، استخدمنا الطفرات الموجهة نحو الموقع لإدخال 20 حمضًا أمينيًا في فيروس الساق القصيرة A/mallard/Huadong/S/2005 (rSNA -20) لاستعادة فيروس الساق الطويلة (rSNA +). كما تم إنشاء سلسلة من فيروسات الساق القصيرة أو الديجليكوزيلاتيد استنادًا إلى فيروس الساق الطويلة، ثم تم تقييم خصائص الفيروسات الناتجة ومدى إصابتها بالأمراض. أظهرت النتائج أن معظم فيروسات الساق القصيرة أو الساق منزوعة الجليكوزيل تحتوي على لويحات أصغر، وزيادة في الحرارة وانخفاض درجة الحموضة، وانخفاض نشاط النورامينيداز عند مقارنتها بالفيروس rSNA+. في دراسة تحدي البط البري، أظهرت معظم فيروسات الساق القصيرة أو الساق ديجليكوزيلاتي زيادة الآفات المرضية وتتر الفيروس في أنسجة الأعضاء وزيادة سفك الفيروس في البلعوم الفموي والمذرق بالمقارنة مع فيروس rSNA +، في حين أن معظم فيروسات الساق القصيرة، وخاصة rSNA -20، أظهرت إمراضية أعلى من فيروس الساق ديجليكوزيلاتي. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت فيروسات الساق القصيرة تعبيرًا منظمًا بشكل كبير عن العوامل المرتبطة بالمناعة في رئتي البط البري المصاب، بما في ذلك IFN - α و Mx1 و IL -8. اقترحت النتائج أن اقتطاع ساق NA أو إزالة الجلوكوز يزيد من إمراضية AIV من النوع الفرعي H5N1 في البط البري، مما سيوفر تحذيرًا مسبقًا للوقاية من إنفلونزا الطيور من النوع الفرعي H5N1 ومكافحتها في الطيور المائية.