O Brasil é um grande produtor agrícola e possui um papel fundamental no setor florestal, no entanto, prejuízos e danos expressivos podem ser atribuídos às formigas-cortadeiras. Atualmente o método mais eficaz para o controle desses insetos são iscas granuladas a base de inseticidas químicos e o uso de microrganismos endofíticos é apontado como uma alternativa por possuírem ação entomopatogênica e fungicida. Em busca de uma opção que promova o desenvolvimento de uma agricultura mais sustentável e competitiva, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a ação de fungos endofíticos de oliveira (Olea europaea), pertencentes aos gêneros Aspergillus sp., Trichoderma sp., Sarocladium sp., e Xylaria spp. sobre operárias de formigas-cortadeiras (Atta sexdens) e seu fungo mutualista (Leucoagaricus gongylophorus). Para avaliar a ação fungicida, foram realizados testes in vitro de pareamento de culturas e testes para avaliar o crescimento do fungo mutualista em meio de cultura incorporado com metabólitos fúngicos não-voláteis (filtrados) nas concentrações de 50% e 25% (v/v). A ação inseticida foi avaliada por um teste de toxicidade pela ingestão de dieta artificial oferecida às operárias, contendo filtrados também nas concentrações de 50% e 25% (v/v). Por fim, o teste de preferência foi realizado para avaliar a escolha das operárias sob oferecimento da solução de metabólitos produzidos pelos cinco isolados fúngicos. Os resultados mostraram que todos os isolados inibiram o crescimento de L. gongylophorus no teste de pareamento. A solução filtrada produzida por Aspergillus sp. e Trichoderma sp. também inibiram o crescimento de L. gongylophorus quando incorporada no meio de cultura nas duas concentrações testadas. No teste de toxicidade, todos os isolados causaram mortalidade nas operárias na concentração de 50%, embora para a concentração de 25% os isolados de Xylaria spp. não apresentaram mortalidade significativa associada à dieta. Aspergillus sp. e Trichoderma sp. apresentaram os melhores resultados com taxas de mortalidade de 96% em ambas as concentrações para Aspergillus sp., e 96% e 78%, respectivamente, para Trichoderma sp. No teste de preferência, os resultados mostraram que apenas Xylaria sp. 1 apresentou não-preferência por parte das colônias. Desse modo, com base nos resultados obtidos, os isolados de Aspergillus sp. e Trichoderma sp. indicam potencial para estudos futuros visando o controle biológico de formigas-cortadeiras