Os estuários com intensa atividade antrópica apresentam diversos grupos de contaminantes, como metais e biocidas que associados, podem ser ainda mais tóxicos do que quando isolados, devido ao efeito combinado dessas misturas. O objetivo deste estudo foi determinar a toxicidade de soluções salinas contendo misturas de contaminantes ambientais do Complexo Portuário do Itaqui - CPI (Maranhão, Brasil), buscando conhecer o efeito da exposição conjunta de metais (Al, Cu, Mn e Zn) e biocidas anti-incrustantes de reforço (irgarol e diuron) em águas salina e salobra, para os embriões da ostra-do-mangue Crassostrea rhizophorae e para a bactéria bioluminescente Vibrio fischeri. Foram construídas diferentes soluções salinas contendo os biocidas anti-incrustantes em dois níveis de concentração: irgarol - 0,001 e 0,01 mg/L; e diuron - 0,005 e 0,01 mg/L, associados aos metais Al, Cu, Mn e Zn nas diferentes concentrações (médias e máximas) quantificados nas estações chuvosa (água salobra) e estiagem (água salina) com base no valores observados durante o monitoramento anual no CPI. Os ensaios ecotoxicológicos evidenciaram: (i) diferença na sensibilidade às misturas entre os embriões de ostra e a bactéria V. fischeri, (ii) efeito dependente das características sazonais da solução construída (salinidade e concentração de metais) e (iii) efeito combinado da mistura metais-biocidas-salinidade. Os resultados sugerem que a presença dos biocidas anti-incrustantes irgarol e diuron e dos metais Al, Cu, Mn e Zn nas condições locais específicas de cada estação climática podem representar risco para as espécies estuarinas residentes, principalmente no período das chuvas.