Debido al importante papel que juegan los materiales de referencia (MR) en el sistema de aseguramiento de la calidad de los laboratorios de análisis de alimentos, esta investigación tuvo como objetivo desarrollar y evaluar un MR de leche en polvo entera para la medición de proteína total. Los estudios de homogeneidad, estabilidad y caracterización se llevaron a cabo siguiendo las recomendaciones de la Guía ISO 35:2017 y la Norma NTC-ISO 13528:2017. El estudio de homogeneidad se realizó utilizando una muestra de 10 unidades bajo condiciones de reproducibilidad, el estudio de estabilidad a corto plazo se realizó a una temperatura de almacenamiento de 27 °C durante 2 meses siguiendo un diseño isócrono. La estrategia de caracterización consistió en la transferencia de valor de un MR muy similar utilizando un único método realizado por un laboratorio. El análisis estadístico aplicado permitió determinar la homogeneidad y la estabilidad del parámetro de proteína total durante el transporte. Finalmente, la asignación del valor de propiedad del material fue 2599 g/100 g de proteína total con una incertidumbre estimada U = ± 0,90 g/100 g.