A lignina extraída da planta forrageira pelo reagente brometo de acetila (lignina brometo de acetila - LBrAc), para ser empregada como padrão de referência no método espectrofotométrico para a determinação quantitativa da lignina, não pode originar-se da planta intacta, devido à interferência de diversas outras substâncias, que absorvem no mesmo comprimento de onda que a lignina; aconselha-se, portanto, que a extração da lignina seja realizada a partir de um dos seguintes compostos: parede celular propriamente dita (PC), fibra em detergente neutro (FDN) ou fibra em detergente ácido (FDA). Os rendimentos das extrações das ligninas, bem como o comportamento espectrofotométrico das mesmas, foram avaliados nestes três compostos provenientes de diversas plantas forrageiras. Na média, os rendimentos das extrações de LBrAc foram relativamente uniformes entre si, entretanto, como a concentração de FDA foi a menor entre todas as preparações (devido principalmente à solubilização da hemicelulose) e como esta não apresentou maior capacidade extrativa da lignina, o rendimento de LBrAc proveniente da FDA, com base na planta inteira, foi o menor observado. A absorção da luz ultravioleta das diversas ligninas foi desigual, revelada pelos espectrogramas traçados, de tal modo a sugerir que a preparação de parede celular adotada para o isolamento da lignina deve ser a mesma para a determinação final da concentração de lignina.