A quantificação de células progenitoras hematopoéticas pelo fenótipo (CD34+/CD45+) ou por cultivo celular (Ensaio Clonogênico – que mede as Unidades de Formação de Colônias - UFC) é usada para determinar a qualidade de produtos de leucaférese aplicados ao transplante de medula óssea. A razão entre os progenitores CD34+ e unidades formadoras de colônia de granulócitos e macrófagos – UFC-GM apresentam grandes variações, mas pode expressar os prejuízos decorrentes da criopreservação destas células. Nosso objetivo foi avaliar a perda de qualidade destes produtos pós criopreservação tendo como referências a relação entre CD34 e UFC pré criopreservação. Material e métodos: Esta análise compreendeu 177 amostras pré-criopreservação e 169 amostras pós-criopreservação. 36 amostras pós-criopreservação foram submetidas a novo cultivo para confirmação de redução da perda de capacidade proliferativa. Para avaliar a quantidade de progenitores por citometria de fluxo, as amostras foram incubadas com anticorpos anti-CD45 e anti-CD34 e analisadas conforme método indicado pela ISHAGE/ISCT. O ensaio clonogênico foi realizado pela cultura de células nucleadas do produto de leucaférese, em meio de cultura semissólido contendo ágar, soro fetal bovino e meio condicionado de linhagem 5637, como fonte de fatores de crescimento. As placas foram incubadas por 12-14 dias. Após o término da incubação, as amostras foram fixadas com vapor de formol até a data de contagem das colônias. A relação entre células CD34+ e UFC foi determinada pelo quociente entre o número de células CD34+ e o número de UFC no produto da aférese. O método de criopreservação foi automatizado e os produtos foram mantidos em nitrogênio líquido. A análise estatística dos valores foi feita pelo teste de Mann-Whitney e t-paired. Resultados: A mediana da relação CD34/UFC em amostras pré criopreservação foi de 36 (3-2143) e em amostras pós criopreservação foi de 102 (2-19171). A perda de capacidade proliferativa pós-criopreservação foi significativa p < 0,0001 (Main-Whitney U). Amostras que pós criopreservação apresentavam perdas fora dos níveis de tolerância foram repetidas e apresentaram resultados semelhantes (R CD34/CFU com mediana 425 e pós repetição 473). Discussão: A perda de capacidade proliferativa pós congelamento é muito variável entre pacientes, é necessário identificar os fatores de risco associados para prever coleta satisfatória aos pacientes com maior risco de perda da qualidade do enxerto pós criopreservação, um estudo de características clínicas dos pacientes ou de propriedades citológicas nestes produtos poderá auxiliar na interpretação destes resultados. Conclusão: O ensaio clonogênico em produtos criopreservados revela a perda de capacidade proliferativa de progenitores pós-descongelamento e pode agregar valores de qualidade juntamente com a viabilidade celular. Observamos que uma taxa de cerca de 25% de amostras apresentam perda significativa da capacidade hematopoética in vitro. Os resultados foram confirmados por repetição do ensaio clonogênico, que apresentou reprodutibilidade.