Цель. Изучить молекулярно-биологические характеристики и провести идентификацию штамма Bacillus sp. ONU14 с энтомопатогенной активностью против вредителя грибов грибного комарика Bradisia pilistriata Frey. Методы. Идентификацию проводили по жирно-кислотному составу методом газожидкостной хроматографии с использованием автоматизированной системы идентификации микроорганизмов MIDI Sherlock и реакции мультиплексной ПЦР с группоспецифическими праймерами. Для молекулярно-биологической характеристики использовали методы фазово-контрастной и электронной микроскопии, SDS-PAGE, метод градиентного ультрацентрифугирования. Результаты. Состав жирных кислот и продукты реакции мультиплексной ПЦР с группоспецифическими праймерами позволяют отнести исследуемый штамм к виду Bacillus thuringiensis. Белковые клеточные включения имеют неправильную форму и при растворении образовывают протоксины с массой приблизительно 66 и 25 кДа. Выводы. С использованием микробиологических и молекулярно-биологических методов охарактеризован эндоспоро-образующий штам Bacillus sp. ONU14 с энтомопатогенной активностью. По жирно-кислотному составу и продуктам реакции мультиплексной ПЦР штамм идентифицирован как Bacillus thuringiensis.

Мета. Вивчити молекулярно-біологічні характеристики та провести ідентифікацію штаму Bacillus sp. ONU14 з ентомопатогенною активністю проти шкідника грибів грибного комарика Bradisia pilistriata Frey. Методи. Ідентифікацію проводили за жирно-кислотним складом методом газорідинної хроматографії з використанням автоматизованої системи ідентифікації мікроорганізмів MIDI Sherlock та реакції мультиплексної ПЛР (полімеразної ланцюгової реакції) із групо-специфічними праймерами. Для молекулярно-біологічної характеристики застосовували методи фазовоконтрастної та електронної мікроскопії, SDS-PAGE, метод градієнтного ультрацентрифугування. Результати. Склад жирних кислот та продукти реакції мультиплексної ПЛР з групо-специфічними праймерами дозволяють віднести досліджуваний штам до виду Bacillus thuringiensis. Виявлені білкові клітинні включення мають неправильну форму та при розчинені утворюють протоксини масою близько 66 та 25 кДа. Висновки. З використанням мікробіологічних та молекулярно-біологічних методів охарактеризовано ендоспоро-утворювальний штам Bacillus sp. ONU14 з ентомопатогенною активністю. За жирно-кислотним складом та продуктами реакції ПЛР штам ідентифіковано як Bacillus thuringiensis.

Aim. To study molecular-biological characteristics and Bacillus sp. ONU14 strain with entomopathogenic activity against mushrooms pest Bradisia pilistriata Frey. Methods. The identification methods were FAMES analysis by GC with MIDI Sherlock identification system and multiplex PCR with group-specific primers. The molecularbiological characteristics were studied with phase-contrast microscopy, electron microscopy, SDS-PAGE and gradient ultracentrifugation. Results. Fatty acids composition and multiplex reaction products identify the strain as Bacillus thuringiensis. Intracellular crystals have irregular shape and form protoxins with 65 and 25 kDa. Conclusions. Endospore-forming Bacillus sp. ONU14 strain with entomopathogenic activity was characterized by the microbiological and molecular-biological methods. Fatty acids composition and multiplex PCR reaction identified it as Bacillus thuringiensis.