Синтезировано новое биологически активное соединение из группы производных 3-гидрокси-3-пирролин-2-она КОН-1, превосходящее по антиамнестическому действию пирацетам. Посторонние примеси (исходные продукты синтеза) метиловый эфир ацетилпировиноградной кислоты (МЭАПВК) и 4-бромбензальдегид (ББА) определяли обращённо-фазной ВЭЖХ. Анализ проводили на колонке С18 (25 см×4,6 мм, сорбент Discovery® С18 с размером частиц 5 мкм). Подвижная фаза: фосфатный буфер (рН 7) – ацетонитрил; режим элюирования – градиентный; длина волны детектирования – 310 нм (для МЭАПВК), 260 нм (для ББА). Линейность разработанной методики определяли на пяти уровнях концентраций МЭАПВК и ББА в пределах 0,05-1,0% от содержания основного вещества субстанции КОН-1. Пределы обнаружения и количественного определения МЭАПВК составили соответственно 0,8 мкг/мл и 1,5 мкг/мл; для ББА 0,3 мкг/мл и 0,5 мкг/мл. Оценку внутрилабораторной повторяемости методики проводили в пределах концентраций МЭАПВК и ББА 2-15 мкг/мл. Относительное стандартное отклонение не превышает 10,0%. Определение правильности методики проводили на трех уровнях содержания примесей в субстанции КОН-1 (0,1, 0,5 и 0,75%). Границы открываемости МЭАПВК и ББА не выходят за пределы 75–125%, рекомендованные при количественном определении примесей с нормой содержания от 0,1 до 1%.

New biologically active substance from group of derivatives of 3-hydroxy-3-pyrrolin-2-on KON-1 which exceeded on antiamnestic action of pyracetam are synthesized. The impurity (the initial product of synthesis) – methilic aether acetylpyrovic acid (MAAPVA) and 4-brombenzaldegid (BBA) was determine by reserve phase HPLC. The analysis performed on C18 column (25сm×4,6mm, sorbent Discovery® С18, 5 µm particle size). Mobile phase: phosphate buffer (pH7) – acetonitrile; elution mode – gradient; the wave length of detection – 310 nm (for MAAPVA), 260 nm (for BBA). Linearity of elaborated methodic determined on the five levels of concentration in the range MAAPVA and BBA of 0,05-1.0% from the content of active substance – KON-1. The limit of detection and limit of quantitation of MAAPVA were 0,8 µg/ml и 1.5 µg/ml and for BBA were 0,3 µg/ml и 0.5 µg/ml, respectively. Evaluation repeatability of methodic conducted in the range concentration MAAPVA and BBA of 2-15 µg/ml. The relative standard deviation (RSD) was no more than 10%. The determination of accuracy conducted on the three levels content of impurities in substance KON-1 (0,1, 0,5 and 0,75%). Limit of recovery of MAAPVA and BBA don’t get out from 75 – 125% which recommended to quantitation the impurity with standard of content from 0,1 to 1%.