Les ARN non codants, y compris les microARN (miARN), soutiennent la progression du gliome. Le miR-21 est un petit transcrit non codant impliqué dans la régulation de l'expression génique dans de multiples voies cellulaires, y compris la régulation de la prolifération. Il a été démontré que l'expression élevée de miR-21 est un facteur majeur de la croissance du gliome. La manipulation de l'expression des miARN est une nouvelle stratégie dans le développement de thérapies contre le cancer. Dans cette étude, nous avons visé à cibler miR-21. En utilisant la technologie d'édition du génome CRISPR, nous avons perturbé les séquences codant miR-21 dans les cellules de gliome. L'épuisement de ce miARN a entraîné la régulation positive de nombreux ARNm cibles miR-21 en aval impliqués dans la prolifération. Phénotypiquement, les cellules de gliome éditées par CRISPR ont montré une migration, une invasion et une prolifération réduites in vitro. Dans les modèles murins immunocompétents, les tumeurs knock-out miR-21 ont montré une croissance réduite entraînant une survie globale accrue. En résumé, nous montrons qu'en éliminant un miARN clé dans le gliome, ces cellules ont une capacité de prolifération diminuée à la fois in vitro et in vivo. Dans l'ensemble, nous avons identifié miR-21 comme une cible potentielle pour les traitements basés sur CRISPR dans le gliome.

Los ARN no codificantes, incluidos los microARN (miARN), apoyan la progresión del glioma. miR-21 es un transcrito pequeño no codificante que participa en la regulación de la expresión génica en múltiples vías celulares, incluida la regulación de la proliferación. Se ha demostrado que la alta expresión de miR-21 es un importante impulsor del crecimiento del glioma. La manipulación de la expresión de miARN es una estrategia novedosa en el desarrollo de terapias contra el cáncer. En este estudio, nuestro objetivo fue dirigirnos a miR-21. Utilizando la tecnología de edición del genoma CRISPR, alteramos las secuencias codificantes de miR-21 en células de glioma. El agotamiento de este miARN dio como resultado la regulación positiva de muchos ARNm diana de miR-21 aguas abajo implicados en la proliferación. Fenotípicamente, las células de glioma editadas con CRISPR mostraron una migración, invasión y proliferación reducidas in vitro. En modelos de ratones inmunocompetentes, los tumores inactivados de miR-21 mostraron un crecimiento reducido que dio como resultado una mayor supervivencia general. En resumen, mostramos que al eliminar un miARN clave en el glioma, estas células tienen una menor capacidad de proliferación tanto in vitro como in vivo. En general, identificamos a miR-21 como un objetivo potencial para la terapéutica basada en CRISPR en el glioma.

Non-coding RNAs, including microRNAs (miRNAs), support the progression of glioma. miR-21 is a small, non-coding transcript involved in regulating gene expression in multiple cellular pathways, including the regulation of proliferation. High expression of miR-21 has been shown to be a major driver of glioma growth. Manipulating the expression of miRNAs is a novel strategy in the development of therapeutics in cancer. In this study we aimed to target miR-21. Using CRISPR genome-editing technology, we disrupted the miR-21 coding sequences in glioma cells. Depletion of this miRNA resulted in the upregulation of many downstream miR-21 target mRNAs involved in proliferation. Phenotypically, CRISPR-edited glioma cells showed reduced migration, invasion, and proliferation in vitro. In immunocompetent mouse models, miR-21 knockout tumors showed reduced growth resulting in an increased overall survival. In summary, we show that by knocking out a key miRNA in glioma, these cells have decreased proliferation capacity both in vitro and in vivo. Overall, we identified miR-21 as a potential target for CRISPR-based therapeutics in glioma.

تدعم الحمض النووي الريبوزي غير المشفر، بما في ذلك الحمض النووي الريبوزي الدقيق (miRNAs)، تطور الورم الدبقي. miR -21 هو نسخة صغيرة غير مشفرة تشارك في تنظيم التعبير الجيني في مسارات خلوية متعددة، بما في ذلك تنظيم الانتشار. وقد تبين أن التعبير العالي عن miR -21 هو المحرك الرئيسي لنمو الورم الدبقي. التلاعب في التعبير عن miRNAs هو استراتيجية جديدة في تطوير العلاجات في السرطان. في هذه الدراسة، كنا نهدف إلى استهداف miR -21. باستخدام تقنية تحرير الجينوم CRISPR، قمنا بتعطيل تسلسل ترميز miR -21 في خلايا الورم الدبقي. أدى استنفاد هذا الحمض النووي الريبوزي المرسال إلى تنظيم العديد من الحمض النووي الريبوزي المرسال المستهدف في المصب 21 المتورط في الانتشار. من الناحية الظاهرية، أظهرت خلايا الورم الدبقي المحررة بواسطة كريسبر انخفاضًا في الهجرة والغزو والتكاثر في المختبر. في نماذج الفئران المؤهلة مناعيًا، أظهرت أورام الضربة القاضية miR -21 انخفاضًا في النمو مما أدى إلى زيادة البقاء على قيد الحياة بشكل عام. باختصار، نظهر أنه من خلال ضرب miRNA الرئيسي في الورم الدبقي، قللت هذه الخلايا من قدرة الانتشار سواء في المختبر أو في الجسم الحي. بشكل عام، حددنا miR -21 كهدف محتمل للعلاجات القائمة على كريسبر في الورم الدبقي.