Powered by OpenAIRE graph
Found an issue? Give us feedback
image/svg+xml Jakob Voss, based on art designer at PLoS, modified by Wikipedia users Nina and Beao Closed Access logo, derived from PLoS Open Access logo. This version with transparent background. http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Closed_Access_logo_transparent.svg Jakob Voss, based on art designer at PLoS, modified by Wikipedia users Nina and Beao Sapientia Repositóri...arrow_drop_down
image/svg+xml Jakob Voss, based on art designer at PLoS, modified by Wikipedia users Nina and Beao Closed Access logo, derived from PLoS Open Access logo. This version with transparent background. http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Closed_Access_logo_transparent.svg Jakob Voss, based on art designer at PLoS, modified by Wikipedia users Nina and Beao
versions View all 1 versions
addClaim

Produção de elicitinas recombinantes de Phytophthora cinnamomi

Authors: Sousa, Nelson Guerreiro Mendes de;

Produção de elicitinas recombinantes de Phytophthora cinnamomi

Abstract

A doença do declínio do sobreiro é um fenómeno complexo que provoca uma diminuição visível do vigor vegetativo da árvore. O fungo Phytophthora cirmamomi está associado a esta doença radicular, provocando a morte maciça das raízes finas, reduzindo acentuadamente a capacidade das árvores para absorver água e substâncias nutritivas do solo, conduzindo ao enfraquecimento gradual das extremidades dos ramos e à queda das folhas. As elieitinas são um grupo de holoproteínas altamente conservadas segregadas por espécies do género Phytophthora (com a excepcção da Phytophthora parasitica var. nicotianae) e por Pythium vexans. Estes polipeptídeos de baixa massa molecular ( ~ 10,3 kDa), constituídas por 98 aminoácidos, induzem uma resposta de hipersensibilidade e resistência sistémica adquirida em espécies de plantas sensíveis. A função das elieitinas na biologia das espécies Phytophthora ainda não é clara, não se sabendo se estas proteínas contribuem directamente para a patogenicidade das espécies Phytophthora. O presente trabalho foi dividido em três partes. Na primeira parte, extraiu-se o RNA total de micélio de P. cirmamomi, a partir do qual se sintetizaram e amplificaram, por PCR, os ORF°s (“Operi Reading Frame ”) dos quatro genes do cluster recorrendo a primers específicos. Os produtos da amplificação foram sujeitos a uma análise de restrição enzimática. Na segimda parte, fez-se um estudo da expressão de elieitinas de diferentes isolamentos de duas espécies de Phytophthora. A análise deste estudo mostrou que o isolamento Pa20 de P. cirmamomi expressa uma maior quantidade de elieitinas e num intervalo de tempo menor, em comparação com os isolamentos estudados de P. cambivora. Na terceira parte, produziu-se B-cinamomina e ot-cinamomina heterólogas. Com o recurso a células de Pichia pastoris, previamente transformadas com o ORF do gene da B-cinamomina induziu-se a expressão da respectiva proteína. Os sobrenadantes contendo a B-cinamomina passaram por mn processo de purificação que incluiu: concentração, diálise, cromatografia de troca iónica e Fast Protein Liquid Chromatngmphy (FPLC). A análise da B-cinamomina foi feita através de SDS-PAGE e immunobloting.

Country
Portugal
Related Organizations
  • BIP!
    Impact byBIP!
    selected citations
    These citations are derived from selected sources.
    This is an alternative to the "Influence" indicator, which also reflects the overall/total impact of an article in the research community at large, based on the underlying citation network (diachronically).
    0
    popularity
    This indicator reflects the "current" impact/attention (the "hype") of an article in the research community at large, based on the underlying citation network.
    Average
    influence
    This indicator reflects the overall/total impact of an article in the research community at large, based on the underlying citation network (diachronically).
    Average
    impulse
    This indicator reflects the initial momentum of an article directly after its publication, based on the underlying citation network.
    Average
    OpenAIRE UsageCounts
    Usage byUsageCounts
    visibility views 7
    download downloads 6
  • 7
    views
    6
    downloads
    Powered byOpenAIRE UsageCounts
Powered by OpenAIRE graph
Found an issue? Give us feedback
visibility
download
selected citations
These citations are derived from selected sources.
This is an alternative to the "Influence" indicator, which also reflects the overall/total impact of an article in the research community at large, based on the underlying citation network (diachronically).
BIP!Citations provided by BIP!
popularity
This indicator reflects the "current" impact/attention (the "hype") of an article in the research community at large, based on the underlying citation network.
BIP!Popularity provided by BIP!
influence
This indicator reflects the overall/total impact of an article in the research community at large, based on the underlying citation network (diachronically).
BIP!Influence provided by BIP!
impulse
This indicator reflects the initial momentum of an article directly after its publication, based on the underlying citation network.
BIP!Impulse provided by BIP!
views
OpenAIRE UsageCountsViews provided by UsageCounts
downloads
OpenAIRE UsageCountsDownloads provided by UsageCounts
0
Average
Average
Average
7
6
Upload OA version
Are you the author of this publication? Upload your Open Access version to Zenodo!
It’s fast and easy, just two clicks!