Las enfermedades degenerativas de la retina (EDR) son un grupo heterogéneo de patologías, algunas hereditarias y otras con un origen complejo, que producen una pérdida progresiva de las células de la retina con la consiguiente pérdida de la agudeza visual pudiendo avanzar hasta producir una ceguera total. En los últimos años y gracias al desarrollo de terapias avanzadas como la terapia génica y celular muchos casos de ceguera podrían ser potencialmente tratables. El descubrimiento de las células madre de pluripotencia inducida o iPSC ha aportado una fuente celular ilimitada con gran potencial ya que gracias a sus propiedades son un instrumento prometedor para el estudio de enfermedades, así como para ser utilizadas en medicina regenerativa e ingeniería tisular. La edición génica es una novedosa tecnología con la se puede manipular con precisión una secuencia del genoma humano para lograr un efecto terapéutico mediante la cual se pueden corregir mutaciones que causan enfermedades, añadir genes terapéuticos a sitios específicos del genoma y eliminar genes letales o secuencias del genoma. En este trabajo se han generado y caracterizado con éxito dos líneas de iPSC a partir de muestras de sangre periférica de pacientes con EDR, como son la degeneración macular asociada a la edad (DMAE) y la retinosis pigmentaria (RP), con el fin de establecer modelos celulares de cada una de las enfermedades y terapia celular de reemplazo. Estas líneas nos han permitido conocer las bases celulares y moleculares que llevan al desarrollo de la enfermedad. Posteriormente, enfocándonos en la medicina regenerativa, con el objetivo de buscar nuevas terapias para tratar a pacientes con DMAE, las iPSC fueron diferenciadas hacia células de epitelio pigmentario de la retina (EPR). Las células obtenidas fueron caracterizadas y trasplantadas en diferentes modelos animales. Se demostrado que las células de EPR sobreviven y mantienen su fenotipo y orientación sin ningún efecto adverso local o sistémico. Por último, en la línea de iPSC obtenida de la muestra de sangre periférica de un paciente con RP causada por una mutación en el gen EYS, se ha pretendido corregir la mutación mediante el uso de CRISPR/Cas9. En este caso aunque se corrigió la fase de lectura en el alelo mutante, no se logró obtener la misma secuencia presente en el alelo silvestre.

Tesis doctoral presentada para optar al título de Doctor por la Universidad de Sevilla. Departamento de Bioquímica y Biología Molecular.--01-06-2021