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Revista Iberoamericana de Micología
Article . 2012 . Peer-reviewed
License: Elsevier TDM
Data sources: Crossref
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Evaluación de la técnica PCR anidada para el diagnóstico de la esporotricosis experimental

Authors: Mireya Mendoza; Ana Brito; Daniel Alejandro Schaper; Vanesa Alexandra Spooner; Primavera Alvarado; Aura Castro; Alexis Fernández;

Evaluación de la técnica PCR anidada para el diagnóstico de la esporotricosis experimental

Abstract

Resumen Antecedentes La esporotricosis causada por el hongo dimorfo Sporothrix schenckii puede presentar una gran diversidad de formas clinicas. El diagnostico de laboratorio se lleva a cabo por estudio micologico y serologico. Muy pocos estudios se han enfocado a la evaluacion de su diagnostico molecular. Objetivo Ensayar la tecnica de reaccion en cadena de la polimerasa (PCR) anidada en el diagnostico de la esporotricosis experimental en organos de ratones y compararla con los estudios micologico y serologico. Metodos Ratones BALB/c fueron inoculados con concentraciones crecientes de las 2 fases morfologicas del hongo. Los animales fueron sacrificados un mes despues de la inoculacion, evaluandose muestras de higado, bazo, pulmon y testiculo para el estudio micologico (examen directo y cultivo) y molecular por PCR anidada, y muestras de sangre para la captacion de anticuerpos especificos contra S. schenckii por inmunodifusion doble. Resultados Los resultados de patogenicidad con las diferentes concentraciones del hongo, y el aislamiento del mismo por cultivo mostraron pocas diferencias en el estudio de las muestras de los organos infectados con las 2 fases morfologicas de S. schenckii . En las muestras de ratones inoculados con la fase micelial los porcentajes de positividad del cultivo y examen directo fueron mayores (100 y 37,5%), en comparacion con los encontrados con los de levadura (73 y 2%). Sin embargo, en el diagnostico molecular por PCR anidada, en estas ultimas muestras, los porcentajes de positividad fueron mayores (75%), encontrandose con el micelio un 43% de resultados positivos. La deteccion de anticuerpos especificos fue positiva en el 100% de todos los grupos de ratones infectados. Conclusiones En el estudio de la esporotricosis experimental en ratones, el cultivo demostro ser una herramienta de gran eficacia, asi como tambien la deteccion de anticuerpos especificos, mientras que la prueba de PCR anidada y el estudio microscopico resultaron ser de de inferior valor diagnostico.

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