Введение Полимиксины, включая полимиксин В, относятся к полипептидным антибиотикам. К этой группе также относятся бацитрацин и колистин. Эти антибиотики продуцируются в основном бактериями рода Bacillus и Paenibacillus и выполняют защитные функции. Они действуют, нарушая проницаемость мембраны бактериальной клетки или взаимодействуя с липополисахаридами мембраны, что приводит к гибели бактерий. В клинической практике полимиксины применяются преимущественно местно, а их использование в системной терапии ограничено из-за высокой токсичности. Целью данной работы является исследование биотехнологического способа получения полимиксина В. Результаты и обсуждения Актуальность применения полимиксинов обусловлена ростом множественной антибиотикорезистентности. Эти антибактериальные препараты особенно эффективны против множественно резистентных грамотрицательных микроорганизмов. Полимиксин В ndash; это полипептидный антибиотик, принадлежащий к группе полимиксинов, который широко используется в медицинской практике. Применение полимиксинов особенно важно в онкологической практике, поскольку у онкологических пациентов часто наблюдаются иммунодефицитные состояния, а инфекции, вызванные высокорезистентными штаммами, могут приводить к летальному исходу. Полимиксин В производится с использованием биотехнологических методов, в частности, с помощью ферментации микроорганизмов. Основными производителями этого антибиотика являются штаммы бактерий Bacillus polymyxa, которые в процессе своего роста на определенных питательных средах синтезируют полимиксин В. Технологический процесс получения полимиксина В, биотехнологическим способом, включает в себя следующие этапы: 1. Получение посевного материала - проращивание спор проводят при температуре 30 deg;C на среде, содержащей крахмал, лимонную кислоту, сульфат магния и другие компоненты. Продолжительность выращивания споровой культуры mdash; около 120 часов. 2. Размножение производственной культуры - осуществляется в колбах и посевных аппаратах при 30 deg;C на среде, содержащей крахмал, соевую муку, карбонат кальция и сульфат аммония. Длительность получения посевного материала наnbsp;каждой стадии - 16-18 ч.3. Основная ферментация - проводится глубинным методом при 37 deg;C в течение 30-40 часов на среде, содержащей крахмал, сульфат магния, соевую муку и карбонат кальция. В ходе культивирования осуществляется аэрация 1 объём воздуха на 1 объём среды в 1 минуту и перемешивание с добавкой стерильного пеногасителя. В качестве пеногасителей для получения полипептидных антибиотиков используют растительные и животные жиры, минеральные масла, а также добавляют поверхностно-активные вещества ПАВ, которые снижают стойкость пены и способствуют её разрушению. 4. Разделение мицелия и культуральной жидкости: Биомассу отделяют на нутч-фильтре, а к полученному нативному раствору добавляют при перемешивании 20% раствор едкого натра до pH 6,0-6,6, затем добавляют катионит Dowex MSC. 5. Очистка - смолу отфильтровывают, промывают водой и элюируют полимиксин B 3% раствором соляной кислоты. Для нейтрализации используют 20% раствор едкого натра до pH 4,5ndash;5,0. Далее активированный уголь перемешивают с раствором в течение 30 минут и затем отфильтровывают. Добавляют до pH 10-10,5, нагревают в течение 10-15 минут при температуре 60 deg;C. Отфильтровывают выпавший осадок полимиксина B основания. Осадок растворяют в воде с pH 4,5ndash;5,5 подкисление проводят с использованием концентрированной серной кислоты. Финишная очистка раствора осуществляется на сульфокислотном катионите. В качестве макропористого сильнокислотного катионита используют Dowex-MSC-1, а в качестве сульфокислотного катионита - КУ-2-20. К полученному раствору полимиксина B сульфата добавляют смолу КУ-2-20, перемешивают в течение 30 минут, затем смолу отфильтровывают, промывают 100 мл воды. Фильтрат и промывную воду объединяют и сушат. Выводы 1. Производство полимиксина В является дорогим и трудоемко процессом, поскольку необходимо постоянно контролировать несколько факторов pH среды, уровень кислорода, глюкозы, температура, давление и концентрация минералов на протяжении длительного времени один цикл может длиться 5-7 дней. 2. Полимиксин В востребован на рынке, так как является антибиотиком bdquo;последней линииrdquo; защиты. У грамотрицательных бактерий не развивается резистентность к нему, и он используется для лечения пациентов с ослабленным иммунитетом, в том числе онкобольных и при заболеваниях ЛОР-органов.