Estudo do mecanismo de ação de novos compostos de ruténio com atividade antitumoral

Master thesis Portuguese OPEN
Carvalho, Andreia Catarina Guerreiro Morais de;
(2017)
  • Subject: Actividade antiproliferativa | Quimioterapia | Complexos de ruténio(II) | Cancro | Mecanismo de ação | Teses de mestrado -2017 | Departamento de Química e Bioquímica

Tese de mestrado, Bioquímica (Bioquímica Médica), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2017 A quimioterapia é um tratamento tradicional do cancro. Sua alta toxicidade, afetando tecidos saudáveis, e a resistência intrínseca a fármacos são obstáculos que prec... View more
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    Localização subcelular ......................................................................................................................... 30 Estudos in vitro da interação dos complexos com o DNA ................................................................... 31 Estudo da clivagem do DNA Plasmídico...................................................................................... 31 Cultura de Escherichia coli e extração do DNA plasmídico .................................................... 31 Espectroscopia de Absorção ....................................................................................................... 31 Dicroísmo circular ....................................................................................................................... 32 Interação com a albumina sérica: BSA e HSA ...................................................................................... 33 Proteómica: eletroforese bidimensional (2-DE) .................................................................................. 33 Preparação da amostra, precipitação e purificação ................................................................... 33 Eletroforese bidimensional (2-DE): Focagem isoelétrica e SDS-PAGE ........................................ 34 Revelação dos géis ...................................................................................................................... 35 4.

    Avaliação do potencial Apoptótico...................................................................................................... 39 Marcação com a sonda Hoechst 33258 e IP ............................................................................... 39 Marcação com Anexina V-FITC e IP. ........................................................................................... 41 Avaliação do potencial de membrana mitocondrial (ΔΨM) ....................................................... 43 Análise dos níveis das proteínas pró- e anti-apoptóticas por Western Blot............................... 45 Deteção da produção intracelular das espécies reativas de oxigénio ........................................ 46 Avaliação do efeito dos compostos na morte celular autofágica ............................................... 48 Estudos de interação com o DNA ........................................................................................................ 53 Estudos de clivagem do DNA ...................................................................................................... 53 Espectroscopia de absorção UV-Vis............................................................................................ 54 Dicroísmo circular ....................................................................................................................... 56

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