Contribution à la formulation et à l'évaluation de liposomes d'ATP

Doctoral thesis French OPEN
Vincourt-Vitse , Véronique , (2012)
  • Publisher: HAL CCSD
  • Subject: Freeze drying | HepG2 | Etomoxir | [SDV.MHEP] Life Sciences [q-bio]/Human health and pathology | ATP | Lyophilisation | [ SDV.MHEP ] Life Sciences [q-bio]/Human health and pathology | Liposome

ATP liposome incorporating hepatic ligands may contribute to improve the energetic status of the liver graft. In a first phase of development, it has been emphasized the great need of stabilizing the liposome (i) and of validating a cellular model with an altered energetic status in order to test the formulations of interest. To provide a stable liposomal preparation, different strategies have been carried out to freeze-dry liposome with or without ATP. Sucrose and trehalose better stabilize the liposome preparation during the freeze-drying process. Nevertheless, in all conditions, a significant ATP leakage has been observed. An inhibitor of the cartinine palmitoyl transferase (i.e. Etomoxir) has shown great interest to modulate the energetic level in HepG2 cells by varying Etomoxir concentration and culture temperature. In conclusion, this study contributes to a better understanding of the critical factors related to liposome freeze-drying and describes hepatic cell models with altered energetic status that may have great interest to test specific agent or innovating formulations.; Les liposomes d’ATP incluant des ligands hépatiques pourraient contribuer à améliorer le statut énergétique du greffon hépatique. Une première phase de développement a mis en évidence la nécessité de stabiliser la forme (i) et de valider un modèle cellulaire à statut énergétique altéré (ii) afin de pouvoir tester différentes formulations liposomales d’intérêt. Afin de résoudre la première problématique, différentes stratégies ont été mises en place lors de la lyophilisation de liposomes blancs ou chargés en ATP. Le saccharose et le tréhalose ont conduit à une stabilisation de la forme avant et après lyophilisation. Néanmoins, quel que soit le procédé, la lyophilisation s’est accompagnée d’une fuite en ATP. L’ajout d’un agent inhibant la cartinine palmitoyl transferase, l’Etomoxir, s’est révélé un modèle intéressant pour moduler le niveau énergétique des HepG2 en fonction de la température et de la concentration utilisée. En conclusion, ce travail contribue à mieux comprendre les facteurs critiques liés à la lyophilisation des liposomes (i) et décrit des modèles cellulaires hépatiques à statut énergétique altéré qui pourraient être mis à profit pour tester différents principes actifs ou formes galéniques innovantes.
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    103 references, page 1 of 11

    2) Alexopoulou, E., Georgopoulos, A., Kagkadis, K. A. & Demetzos, C. 2006. Preparation and characterization of lyophilized liposomes with incorporated quercetin. J Liposome Res, 16, 17-25.

    3) Alia, M., Ramos, S., Mateos, R., Bravo, L. & Goya, L. 2005. Response of the antioxidant defense system to tert-butyl hydroperoxide and hydrogen peroxide in a human hepatoma cell line (HepG2). J Biochem Mol Toxicol, 19, 119-28.

    4) Angell, C. A. 2002. Liquid fragility and the glass transition in water and aqueous solutions. Chem Rev, 102, 2627-50.

    5) Arakawa, A., Ishiguro, S., Ohki, K. & Tamai, M. 1998. Preparation of liposomeencapsulating adenosine triphosphate. Tohoku J Exp Med, 184, 39-47.

    6) Arangoa, M. A., Duzgunes, N. & Tros de Ilarduya, C. 2003. Increased receptormediated gene delivery to the liver by protamine-enhanced-asialofetuinlipoplexes. Gene Ther, 10, 5-14.

    7) Aso, Y. & Yoshioka, S. 2005. Effect of freezing rate on physical stability of lyophilized cationic liposomes. Chem Pharm Bull (Tokyo), 53, 301-4.

    8) Astier, A. & Paul, M. 1989. Instability of reduced glutathione in commercial Belzer cold storage solution. Lancet, 2, 556-7.

    9) Bandyopadhyay, P., Ma, X., Linehan-Stieers, C., Kren, B. T. & Steer, C. J. 1999. Nucleotide exchange in genomic DNA of rat hepatocytes using RNA/DNA oligonucleotides. Targeted delivery of liposomes and polyethyleneimine to the asialoglycoprotein receptor. J Biol Chem, 274, 10163-72.

    10) Barlovatz-Meinmon, G. & Adolphe, M. 2003. Culture de cellules animales. In: éd., N. (ed.) Culture de cellules animales. Paris: INSERM.

    11) Behari, J. R. & Nihal, M. 2000. Galactosylated liposomes as carriers for targeting meso-2,3-dimercaptosuccinic acid to cadmium storage sites in cadmium exposed mice. Ind Health, 38, 408-12.

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