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É proposta uma análise ao papel da educação nas sociedades envelhecidas, nomeadamente na promoção de novas formas de diálogo e partilha de experiências entre gerações. Considerando aquele que é o movimento multiforme do fenómeno de envelhecimento, visa-se um aprofundamento à complexidade de dinâmicas de relações que se jogam entre, por um lado, as possibilidades de aprendizagem e aquisição cultural subjacentes na oferta educativa e, por outro lado, as escolhas, orientações e vivências de reconfiguração identitária promovidas naqueles e naquelas que compõem os segmentos etários mais velhos de novos públicos, não tradicionais, da população estudantil. A abordagem desenvolvida tem por base um estudo de caso desenvolvido na Faculdade de Letras da Universidade de Lisboa, articulando dois níveis de análise. No plano macro-meso considera os impactos e desafios assumidos pela Universidade nas configurações de lifelong learning face às possibilidades de participação ativa dos cidadãos em fases mais avançadas das suas vidas num espaço de partilha intergeracional. No plano micro (onde se centra a presente comunicação), equacionam-se essas experiências nas suas relações com o desenvolvimento de competências de literacia, que variam de acordo com as estruturas de oferta formativa (formal e não formal). info:eu-repo/semantics/publishedVersion

The evidence gathered has not yet produced a clear picture of how the institutional (i.e. macro) and behavioural (i.e. micro) relationship/link works for doctors in hospital organizations, in particular with regard to their reasons for being for or against organizational change driven by managerial values. This article seeks to address this issue by looking at what structures the actions of doctors, in order to see possible reasons for the conflict and alliances among them and between them and? managers. Drawing on qualitative, in-depth research conducted in a hospital organization, with the focus on doctors from two wards (one surgery and one internal medicine), differences in their actions and discourses challenge the coherence associated, as a rule, with professional values and organizational culture. Rather than denying these influences/differences, we relate them to the way the medical professionals reflexively make use of their roles in situated circumstances. In sum, this presentation discusses not only the fact that the doctors’ medical rationale is crisscrossed by a diversity of influences – ethics, management itself and the organizational culture and subcultures – but also that they make reflexive deliberations about themselves and that their personal interest(s) are defined in relation to specific contexts. Theoretically, the analysis is aligned with other work on critical realism, which is expected to refine the study of organizations as inhabited spaces by adding empirical accuracy to theoretical arguments in social theory on reflexivity. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

The eukaryotic release factor 3 (eRF3) associates with eRF1 in a complex that mediatestranslation termination. In addition to its roles in translation, eRF3 is also involved in cell cycleregulation, apoptosis and cytoskeleton assemble. Human eRF3 has two distinct isoforms, eRF3aand eRF3b, encoded by eRF3a/GSPT1 and eRF3b/GSPT2 genes.eRF3a/GSPT1 contains a stable (GGC)n expansion coding for proteins with different N-terminalextremities. We identified five alleles encoding 7, 9, 10, 11 and 12 GGC repeats in thePortuguese population, being the 10GGC allele the most frequent (F= 68.5% in the controlpopulation). The longer allele (12GGC) was exclusively detected in 5.1% of the cancer patients(N=411) with an allele frequency of 3%, corresponding to a 12-fold increased cancer risk.Our results show that the mRNA levels of eRF3a/GSPT1 are overexpressed in a significantproportion of different types of cancer. Moreover, the transcript levels of eRF3a/GSPT1 showvariation between alleles, being the 12GGC allele significantly overexpressed (p<0.001). Thelevels of eRF3a/GSPT1 transcription are not associated with eRF3a/GSPT1 amplification neitherwith the methylation pattern of the GGC expansion region.Using an in vivo assay for readthrough efficiency, we do not detect any difference in the activityof the eRF3a proteins encoded by the five different eRF3a/GSPT1 alleles. Also, no differences inthe levels of apoptosis and proliferation rates were found between cells lines. Finally, using acytokinesis-block micronucleos assay, we show that cells with the longer alleles have higherfrequencies of MN, which is probably a result of defects in mitotic spindle formation.Although the connection between eRF3a/GSPT1 and tumorigenesis is not completely elucidated,our data suggests that the presence of the 12GGC allele provides a novel risk marker for cancer.Taken together, our results show that eRF3a should be considered as a potential proto-oncogene Fundação Para a Ciência e a Tecnologia (SFRH/BD/21468/2005, projects POCTI/MGI/40071/2001 and PTDC/SAU-GMG/67031/2006) Tese de doutoramento, Biologia (Biologia Molecular), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2009

Nos impérios ibéricos da Época Moderna, a criação de dioceses correspondia à continuação da política de apropriação dos espaços imperiais, integrando- -os nas lógicas de governo das monarquias católicas e densificando a malha jurisdicional que recaía sobre cada território. Na Ásia portuguesa, a construção da rede diocesana seguiu de perto os ritmos de expansão geográfica do Coroa Portuguesa, implementando novos bispados em zonas que era necessário reenquadrar administrativamente. No caso do bispado de Macau (1576), bem como do Japão (1588), o envio de bispos foi também um modo de dar resposta às necessidades do labor evangelizador que se apresentava profícuo, procurando dar-lhe maior apoio e consistência, ao mesmo tempo que se reforçava a autoridade régia sobre os territórios, diminuindo, mas não anulado, a autonomia dos comerciantes locais e da Companhia de Jesus.

A produção de energia eólica, à semelhança de outras energias renováveis, apresenta diversas vantagens relativamente às fontes de energia tradicionais. Contudo, hoje em dia, é reconhecida a existência de potenciais impactes, nomeadamente sobre os sistemas biológicos. Entre os grupos faunísticos mais afectados encontram-se os vertebrados voadores, podendo a construção destes projectos ser responsável, por exemplo, pela perda directa e alteração de habitat, efeito de barreira ou perturbação das áreas de nidificação. Embora nos últimos anos tenha sido dada atenção aos vários impactes, a mortalidade de aves e quirópteros, directamente causada pela colisão com os aerogeradores tem sido o impacte que maior preocupação desperta. Uma questão central na monitorização de parques eólicos prende-se, por isso, com a quantificação da mortalidade de aves e quirópteros causada por colisão com os aerogeradores. Nos estudos de monitorização a estimação da mortalidade baseia-se na contagem de animais mortos. Porém é amplamente reconhecido que a mortalidade observada subestima a mortalidade real. As principais razões que justificam esta diferença prendem-se com (1) a ocorrência de remoção de cadáveres de aves/morcegos (por predadores, decomposição ou outro), (2) a detecção imperfeita pelos observadores e (3) a prospecção parcial do parque. Conceptualmente, a quantificação da mortalidade tem por base a ideia de que a mortalidade real poderá ser estimada corrigindo a mortalidade observada com a probabilidade de encontrar um cadáver. A diferença entre as mortalidades real e observada será tanto maior quanto menor for esta probabilidade. Assumindo que os cadáveres são encontrados independentemente uns dos outros, então o número de cadáveres encontrados numa visita ao parque é uma variável aleatória binomial com parâmetros definidos pelo número de animais mortos na região de estudo (dimensão da população, N) e probabilidade de encontrar um cadáver (P). Nestas condições, assumindo a probabilidade de encontrar um cadáver conhecida, o estimador de máxima verosimilhança do número de animais mortos presentes na região no dia da visita é dado pela razão entre o número de cadáveres encontrados e a probabilidade de encontrar um cadáver. Contudo, na maioria das situações, esta probabilidade é desconhecida. Assim, estimar N implica estimar P. Para encontrar um cadáver em campo é necessário que ele (1) esteja na área prospectada (área coberta na amostragem definida por desenho experimental), (2) esteja disponível para ser encontrado e (3) seja detectado pelo observador. Assumindo a independência entre os três acontecimentos, a probabilidade de encontrar um cadáver é dada pelo produto entre a probabilidade de inclusão da área prospectada na amostra, a probabilidade de estar disponível para ser encontrado (não ser removido) dado que se encontra na área prospectada e a probabilidade de detecção do cadáver dado que se encontra na área prospectada e não foi removido. Tipicamente num estudo de monitorização de um parque eólico, o campo é dividido em tantas áreas quantos turbinas existirem, sendo seleccionadas por amostragem aleatória simples as turbinas a incluir no estudo, cuja área de influencia será prospectada. Assim, a probabilidade de inclusão desta área no processo de amostragem é definida por desenho experimental tendo em conta a proporção de turbinas incluídas no estudo ou a área sob influencia das turbinas seleccionadas. A probabilidade de estar disponível para ser encontrado é definida pela esperança matemática da probabilidade de permanência de um cadáver. A análise de sobrevivência é uma metodologia estatística que possibilita a análise de dados relativos a tempos de "vida", num sentido lato, isto é, que se aplica a todas as situações em que interessa modelar o tempo até à ocorrência de um determinado acontecimento, aplicando-se por isso, neste domínio. Até à presente data, esta metodologia, apesar de adequada ao estudo formal dos tempos de permanência, não tem sido utilizada neste contexto. Os estudos publicados são escassos e as metodologias usadas não estão uniformizadas. A análise estatística dos tempos de remoção é frequentemente limitada a procedimentos descritivos ou, usando procedimentos inferenciais, não tem em conta a típica assimetria positiva da densidade dos tempos de permanência e/ou facto de existirem observações censuradas. Alguns autores reconhecem a existência de observações censuradas, ajustando os estimadores à presença de censura à direita, mas assumem a priori uma distribuição exponencial dos tempos de permanência. A determinação da esperança matemática da probabilidade de permanência envolve a estimação da função de sobrevivência do tempo de permanência. As opções de modelação desta variável incluem metodologias não-paramétricas, semi-paramétricas e paramétricas. A modelação paramétrica de tempos de permanência, sob validade de um certo modelo probabilístico, pode permitir obter inferências mais precisas do que as obtidas por métodos não paramétricos, assumindo verdadeiro aquele pressuposto. Um dos aspectos fundamentais na modelação paramétrica é por isso a escolha do modelo probabilístico subjacente aos dados. O primeiro passo na análise do tempo de permanência dos cadáveres deverá consistir na exploração da respectiva forma da distribuição. São vários os modelos paramétricos repetidamente encontrados na literatura no âmbito da modelação de tempos de "vida". De entre os mais comuns, têm-se os modelos exponencial, Weibull, log-normal e log-logístico. Os métodos disponíveis para a escolha de uma distribuição particular incluem além de procedimentos gráficos, procedimentos inferenciais que, de um modo mais formal, validam um modelo paramétrico em detrimento de outro. Como ponto de partida para uma análise de sobrevivência paramétrica rigorosa, neste estudo são discutidos os métodos de discriminação entre modelos probabilísticos para os tempos de permanência registados em testes de remoção levados a cabo em parques eólicos nacionais. A validação formal de um modelo probabilistico envolve frequentemente a realização de testes de ajustamento baseados na função de distribuição empírica. Contudo, no caso de observações censuradas pouco é conhecido sobre a potência deste tipo de testes. Neste trabalho, foi feito um estudo por simulação da potência relativa dos testes de ajustamento baseados nas estatísticas de Kolmogorov-Smirnov, Cramér-Von-Mises e Anderson-Darling, variando as distribuições sob as hipóteses nula e alternativa, a dimensão da amostra, o grau de censura e o nível de significância. Nesta tese foi também efectuada a comparação das metodologias paramétricas e semi-paramétricas (Regressão de Cox) na modelação da função de sobrevivência dos tempos de permanência. Adicionalmente discute-se a importância da selecção do modelo probabilístico no contexto da estimação da função de sobrevivência e mortalidade. A estimação da probabilidade de detecção do cadáver é enquadrada no contexto formal da amostragem por distâncias. Neste contexto, a variação da detectabilidade é explicada como função da distância entre o objecto e o ponto de amostragem. Na abordagem convencional assume-se que a distribuição dos objectos em relação aos pontos de amostragem (pontos ou linhas) é uniforme. A utilização das turbinas como pontos a partir das quais é efectuada a amostragem dos cadáveres põe em causa este pressuposto. De facto, dado que a morte das aves/morcegos ocorre por colisão com as turbinas, a localização dos cadáveres está altamente dependente da localização das turbinas. Em consequência, a distribuição espacial de cadáveres à volta das turbinas não é uniforme. Neste estudo, considerou-se a utilização de uma uniforme truncada à esquerda para descrever a distribuição espacial dos cadáveres em torno das turbinas. Contudo para responder à não verificação do pressuposto de uma densidade constante, consideraram-se as distribuições gama e log-normal para modelar a distribuição espacial dos cadáveres. Conclui-se com a apresentação de um estimador da mortalidade que integra no espaço e no tempo a mortalidade observada corrigida pela remoção, detectabilidade imperfeita e cobertura parcial. O estimador apresentado soluciona algumas das limitações de métodos anteriormente usados, como sejam, a imposição da utilização de intervalos de tempo regulares entre amostragens e o pressuposto de uma distribuição exponencial dos tempos de permanência dos cadáveres até à remoção. O método possibilita ainda a modelação de populações heterogéneas e permite considerar densidades não uniformes de cadáveres em torno das turbinas. In wind farms, the observed fatality is known to underestimate the real fatality because of carcass removal, imperfect detection and partial coverage. The maximum likelihood estimator for the number of carcasses is defined by the ratio between the number of found carcasses and the encounter probability. Under an independence assumption, this probability can be estimated by the product of (1) the probability that a carcass is in the covered region, (2) the probability of persisting and (3) the probability of detection. The probability that a carcass is in the covered region is defined by design. The latter probabilities are model-based estimated. The average probability of persisting is estimated using survival analysis. Parametric models based on the exponential, Weibull, log-logistic and log-normal distributions were used as these are among the most common used lifetime models. In this study we explore how to discriminate between these four competing models. A common way to formally test for a distributional assumption is the use of goodness-offit (GoF) statistics based on the empirical distribution function. The statistical power of some GoF statistics was investigated varying the null and the alternative distributions, the sample size, the degree of censoring and the significance level. The results obtained from using semiparametric and parametric methods to model data collected at ten Portuguese wind farms are presented and compared. The average detection probability is defined using distance sampling approach, considering point transect at turbines locations. Conventional distance sampling assumes a constant mean density with respect to samplers’ location. In wind farms the spatial distribution of the dead animals is known to be highly dependent on the turbine location. Hence, non-uniform density around sampling points has been considered. This study concludes presenting a mortality estimator that integrates over space and time the observed fatality corrected for carcass removal, imperfect detection and partial coverage.

A ocorrência de movimentos de vertente desencadeados por eventos de precipitação intensa de curta duração ou de precipitação persistente e prolongada têm-se traduzido em consideráveis prejuízos materiais na região a norte de Lisboa, relacionados com a afetação/destruição total ou parcial de infraestruturas, em particular de vias de comunicação e edifícios. Este facto adquire particular relevância nas áreas periurbanas, como é o caso da Bacia do Rio Grande da Pipa, face ao potencial de crescimento que resulta da sua proximidade à cidade de Lisboa. De forma exploratória, este estudo permitiu avaliar o padrão de danos em edifícios e estradas, tendo por base: a resistência do elemento exposto, a intensidade do movimento de vertente e a relação espacial entre o elemento afetado e os diferentes sectores do movimento de vertente. No caso dos edifícios a escassez de dados não permitiu tirar ilações significativas. No caso das estradas, podem ser inferidos três padrões de deformação, distintos pela forma como se relacionam com o sector do movimento que origina os danos. Quando o movimento está localizado acima da via o grau de perda registado foi negligenciável. Nos casos em que as estradas se localizam no corpo o grau de perda foi ligeiro a significativo. Nos casos em que as estradas foram afetadas pela cicatriz ou flanco do movimento o grau de perda foi muito diversificado e dependente do desnível vertical aí existente.

As doenças crónicas do fígado são consideradas um grande problema de saúde pública dada a sua elevada prevalência e incidência, em paralelo com a ocorrência de graves complicações a longo prazo, como cirrose, carcinoma hepatocelular (CHC) e, em última instância, morte prematura. Em particular, o fígado gordo não-alcoólico (FGNA) e a doença hepática colestática crónica são duas condições patológicas distintas, mas que têm em comum um desenvolvimento de natureza progressiva e a falta de terapias médicas eficazes. Por sua vez, a morte celular persistente é dominante no desencadear de inflamação crónica, fibrose e proliferação celular compensatória, aumentando o risco de desenvolvimento de cancro. De facto, a ativação dos recetores de morte pelo fator de necrose tumoral-α (TNF-α) e por outros ligandos tem sido largamente implicada em patologias hepáticas. No entanto, a maioria dos estudos publicados até agora tem-se focado na apoptose como consequência desta ativação, descurando-se o papel da necrose que representa, também, uma característica fundamental das doenças hepáticas. Em particular, a necrose regulada ou necroptose foi recentemente descrita como uma via de morte celular, morfologicamente semelhante à necrose, mas ocorrendo de forma regulada e, portanto, sendo passível de possíveis intervenções terapêuticas dirigidas. Em termos clássicos, a necroptose ocorre a jusante TNF-α e depende das cinases receptor-interacting protein 1 (RIP1) e 3 (RIP3). No entanto, em contextos celulares específicos, o aumento dos níveis de RIP3 é suficiente para desencadear a necroptose, salientando o seu papel fundamental na regulação deste processo de morte. Por seu turno, a cinase RIP3 recruta e fosforila a proteína mixed lineage kinase domain-like (MLKL), a qual oligomeriza e forma poros nas membranas celulares, desempenhando um papel crítico na execução da necroptose. Como o resultado final, a célula é permeabilizada, com a libertação concomitante do seu conteúdo celular imunogénico e, por esta razão, a necroptose tem sido implicada na patogénese de doenças inflamatórias. O objetivo principal desta tese foi avaliar o papel da necroptose na patogénese do FGNA e da doença hepática colestática, e se a sua inibição poderá constituir uma potencial abordagem terapêutica. O FGNA é a doença hepática crónica mais comum nos países ocidentais e apresenta uma prevalência e incidência crescentes devido à sua forte associação com obesidade e síndrome metabólico. O FGNA engloba um espectro de disfunção hepática, que vai desde a esteatose simples à esteatohepatite não alcoólica (EHNA), a qual está associada a inflamação e morte celular e que, por sua vez, pode evoluir para cirrose e CHC. Os nossos resultados mostram que o aumento da expressão hepática de RIP3 é um denominador comum a várias doenças hepáticas crónicas, nomeadamente FGNA, mas também esteatohepatite alcoólica e hepatites crónicas virais. Além disso, doentes com FGNA apresentam níveis aumentados de marcadores gerais de necrose em circulação, bem como aumento da fosforilação de MLKL no fígado, uma característica distintiva da ativação da necroptose. A avaliação da fosforilação de MLKL e do sequestro de RIP3 e MLKL nas frações proteicas insolúveis de fígado de murganho indicaram que a necroptose também se encontra ativa no fígado em animais alimentados com duas dietas diferentes indutoras de FGNA. Mais ainda, a inibição da necroptose através do silenciamento genético de RIP3, reduziu o dano hepático, a esteatose, a inflamação, a fibrose e o stress oxidativo. Estudos funcionais em hepatócitos primários de roedores demonstraram, ainda, uma associação entre o estímulo TNF-α e a indução de stress oxidativo dependente da sinalização por RIP3. De seguida, avaliou-se o do papel da necroptose na progressão da EHNA para CHC. Para recapitular o espectro completo do FGNA e da sua progressão para CHC, utilizou-se um modelo experimental baseado na dieta deficiente em colina e com a composição em aminoácidos definida (CDAA), um modelo validado de CHC dependente de FGNA. Neste modelo, murganhos alimentados com a dieta CDAA durante 32 semanas apresentaram EHNA, enquanto que a alimentação até às 66 semanas induziu a formação de nódulos pré neoplásicos/neoplásicos. Por outro lado, a ausência de RIP3 reduziu a inflamação e a fibrose durante a alimentação com a dieta CDAA por 66 semanas, refletindo-se numa melhoria da evidência histológica de EHNA. Além disso, e embora o número de nódulos não tenha sido significativamente afetado pela ausência de RIP3, estes animais apresentaram uma diminuição da proliferação compensatória dos hepatócitos, assim como níveis reduzidos de stress oxidativo e resistência genética à morte celular em hepatócitos displásicos, para além de normalização de vias de sinalização envolvidas na criação do microambiente tumoral. Ainda assim, os murganhos knockout RIP3 revelaram um maior aumento de peso corporal ao longo do tempo, hiperlipidémia e aumento da resistência à insulina, particularmente após 32 semanas. Assim, a inibição da necroptose poderá constituir uma nova abordagem para travar a progressão de EHNA para fibrose e CHC, embora estudos futuros devam avaliar o risco de efeitos metabólicos adversos associados à inibição de RIP3. Em paralelo com o estudo da necroptose no FGNA, também se avaliou o papel da morte celular na patogénese da doença hepática colestática. Os resultados mostraram que a coloração com tioflavina T e a expressão de RIP3 e MLKL estavam significativamente aumentadas no fígado de doentes com colangite biliar primária (CBP), indicando a ativação de necroptose. Num modelo experimental de colestase aguda e fibrose biliar secundária, por laqueação do ducto biliar comum (LDB), observou-se hiperplasia progressiva dos ductos biliares, necrose multifocal, fibrose e inflamação, com a concomitante ativação de necroptose no fígado, demonstrada pelo aumento de expressão e atividade de RIP3, assim como pela acumulação de RIP3 e MLKL na fração proteica insolúvel do fígado. Por outro lado, a ausência de RIP3 suprimiu a necrose e inflamação aguda e crónica, após a LDB. Os níveis séricos das enzimas hepáticas, a expressão hepática de citocinas pró inflamatórias e fibrogénicas, assim como o stress oxidativo estavam também diminuídos em murganhos knockout RIP3, 3 dias após a LDB (fase aguda). No entanto, aos 14 dias (fase crónica), a colestase foi agravada e a fibrose manteve-se inalterada, ao mesmo tempo que foi detetado um aumento da proteína heme oxygenease-1 e acumulação de ferro. Face aos resultados anteriores, e uma vez que foi já demonstrado que a inibição do miR-21 previne a necroptose no pâncreas de murganhos, assim como a fibrose biliar secundária induzida pela LDB, avaliou-se se a inibição genética do miR-21 reduz a necrose, a inflamação e a fibrose associadas à LDB. Estudos iniciais em hepatócitos primários de murganho estabeleceram uma ligação funcional entre o miR-21 e a necroptose através da cyclin dependent kinase 2 associated protein 1 (CDK2AP1). Verificou-se, também, que o miR-21 estava aumentado no fígado de doentes com CBP e em ratinhos sujeitos a LDB. A ablação genética de miR-21 atenuou a necroptose, o dano hepático e o stress oxidativo, assim como a expressão de genes pro-fibrogénicos. Mais ainda, ratinhos deficientes em miR-21 apresentaram também uma resposta adaptativa melhorada na homeostase dos ácidos biliares. Estes resultados indicam que a necroptose representa um evento patogénico da doença colestática e sugerem a inibição do miR-21 como uma estratégia promissora para o tratamento das doenças hepáticas colestáticas. No seu todo, estes estudos indicam que a inibição da necroptose poderá, pelo menos em parte, inibir a patogénese do FGNA e do CHC associado ao FGNA, assim como da doença colestática. A inibição do miR-21 reduz a necroptose e pode, ainda, apresentar outros efeitos citoprotetores complementares. Uma melhor compreensão da necroptose e dos seus efeitos múltiplos e intricados na fisiopatologia da doença hepática deverá, certamente, contribuir para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas para o FGNA e doença colestática baseadas na modulação daquelas vias de sinalização celular. Chronic liver diseases are considered a major public health concern, and their prevalence and incidence are increasing with serious long-term implications, such as cirrhosis, hepatocellular carcinoma (HCC) and, ultimately, premature death. In particular, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) and chronic cholestatic liver disease are two distinct pathologic conditions sharing a progressive nature and lacking effective medical therapies. Persistent cell death represents a dominant trigger for chronic inflammation, fibrosis and compensatory cell proliferation, increasing the risk of cancer. Of note, necroptosis or regulated necrosis, which depends on kinase activity of receptor-interacting protein 3 (RIP3), was recently described as novel immunogenic type of cell death that may pathologically impinge on inflammation-driven liver diseases. The main goal of the work presented in this thesis was to evaluate the role of necroptosis in human and experimental models of NAFLD and cholestatic liver disease, and to test whether its inhibition could provide potential therapeutic benefits. First, the role of necroptosis in human and experimental NAFLD was evaluated. We showed that hepatic necroptosis is triggered in NAFLD patients and in two dietary models of non-alcoholic steatohepatitis (NASH), playing a role in disease progression. Indeed, inhibition of necroptosis through genetic ablation of Rip3 attenuated liver injury, steatosis, inflammation, fibrosis and oxidative stress in mice fed a methionine- and choline-deficient NASH-inducing diet. In turn, tumor necrosis factor-α (TNF-α) was shown to trigger RIP3-dependent oxidative stress during hepatocyte necroptosis. We next explored the role of RIP3-dependent signaling in NAFLD-associated HCC using the choline-deficient L amino acid-defined (CDAA) diet murine model. Remarkably, despite associating with increased insulin resistance and hepatic steatosis, absence of RIP3 decreased long-term inflammation and fibrosis, compensatory proliferation of hepatocytes, oxidative stress, genetic cell death resistance in dysplastic hepatocytes, and tissue microenvironment alterations closely associated with NAFLD-driven hepatocarcinogenesis. In parallel, we evaluated the role of necroptosis in mediating deleterious processes associated with cholestatic liver disease. Our results showed that necroptosis is triggered in the liver of primary biliary cholangitis patients (PBC), mediating hepatic necro-inflammation induced by common bile duct ligation (BDL) in mice. However, deletion of Rip3 failed to prevent BDL-induced secondary biliary fibrosis and was associated with enhanced chronic cholestasis and hepatic iron accumulation, through up-regulation of heme oxygenase-1. As an alternative putative therapeutic approach, we next evaluated whether ablation of microRNA-21 (miR-21) could simultaneously prevent necroptosis and fibrosis in BDL mice. Functional studies established the association between miR-21, its target cyclin dependent kinase 2 associated protein 1 (CDK2AP1) and necroptosis. Further, miR-21 was found increased in the liver of PBC patients and BDL mice, whereas deletion of miR-21 attenuated necroptosis, liver damage, oxidative stress and expression of pro-fibrogenic genes in BDL mice. miR-21 ablation further improved BDL-induced adaptive responses in bile acid homeostasis. Taken together, our studies highlight that inhibition of necroptosis may, at least partially, inhibit NAFLD and NAFLD-associated HCC, as well as cholestatic liver disease pathogenesis. miR-21 inhibition reduces necroptosis and may also afford complementary protective effects. A broader understanding of necroptosis and its intricate role in liver pathophysiology is likely to provide a rationale for the development of therapeutic strategies for NAFLD and cholestatic liver disease based on the targeting of necroptosis-associated signaling pathways. Tese de doutoramento, Farmácia (Biologia Celular e Molecular), Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2017 Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT), PTDC/BIM-MEC/0895/2014

Pamila Gupta é Professora Associada do Wits Institute for Social and Economic Research (WISER), na Universidade de Witwatersrand, Joanesburgo, África do Sul. É doutorada em Antropologia Sociocultural pela Columbia University. A sua investigação incide sobre vínculos e legados lusófonos (pós) coloniais na Índia e em África. Tem publicado nas revistas Interventions, South African Historical Journal, African Studies, Critical Arts, Journal of Asian and African Studies, Ler História e Ecologie&Politique. Co-organizou Eyes Across the Water: Navigating the Indian Ocean, com Isabel Hofmeyr e Michael Pearson (UNISA, 2010). Em 2014, publicou The Relic State: St. Francis Xavier and the Politics of Ritual in Portuguese India, na Manchester University Press. A sua mais recente colecção de ensaios, intitulada Portuguese Decolonization in the Indian Ocean World: History and Ethnography, foi publicada pela Bloomsbury Press, em 2018 Pamila Gupta is na Associate Professor at WISER (Wits Institute for Social and Economic Research) at the University of Witwatersrand in Johannesburg, South Africa. She holds a PhD in Socio-cultural Anthropology from Columbia University. Her research explores Lusophone (post)colonial links and legacies in India and Africa. She has published in Interventions, the South African Historical Journal, African Studies, Critical Arts, the Journal of Asian and African Studies, Ler História, Ecologie & Politique, and Public Culture, and is the co-editor of Eyes Across the Water: Navigating the Indian Ocean with Isabel Hofmeyr and Michael Pearson (UNISA, 2010). Her monograph entitled The Relic State: St. Francis Xavier and the Politics of Ritual in Portuguese India was published in 2014 by Manchester University Press. Her newest collection of essays entitled Portuguese Decolonization in the Indian Ocean World: History and Ethnography was published by Bloomsbury Press in 2018.